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(無題) 削除/引用 No.967-8 - 2012/10/03 (水) 01:01:10 - 脂肪 ウエスタンや複合体の酵素活性、酸素消費も測ってました。 分画時にDTT入れなくても特に困ったことはなかったです。マジで。 なのであまり深く考えたことはなかったですが、気にし出せば気になっちゃうかもですね。 個人的にMethods in Enzymologyは参考になりましたね。 古い奴も探せる環境でしたら、一度目を通されてはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.967-7 - 2012/09/29 (土) 11:42:01 - おお >[Re:6] ajiさんは書きました : > 植物以外でDTTを入れている例はそんなにあるものですか？そうそう見かけないと思いますけど。 古い文献にはあるんですよ、動物でも。植物では入れると言うのなら酵素とかにはあまり影響しないかもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.967-6 - 2012/09/29 (土) 11:04:39 - aji 植物以外でDTTを入れている例はそんなにあるものですか？そうそう見かけないと思いますけど。

(無題) 削除/引用 No.967-5 - 2012/09/29 (土) 03:52:25 - おお >[Re:4] 脂肪さんは書きました : > あ、ちなみに私は入れてません。 > 最初に教わった人が別に入れなくていいよって言ってたので。 > 今まで特に困ったことはないです。 > （気付いてないだけかも知れませんが・・・） ありがとうございました。ちなみにどの様な分析をそれでされているのでしょうか? 差し支えない範囲で教えていただければ幸いです。タンパクのウエスタンとかでしょうか?それともお名前から察するにミトコンドリアの脂質成分の解析でしょうか? > > 酸化防止すると何かいいことあるんでしょうかねぇ？ > そもそもミトコンドリアって活性酸素だらけだと思うんですが。 活性酸素は出てるでしょうね。SODがあるのですが、カタラーゼはミトコンドリア内にありましたっけ。。。あと還元剤は呼吸さの電子伝達系とか影響があるのかもしれませんが、、、精製の最後でに抜けばすむことなのか、、最初から入ってない方がいいのだろうかとか、、、そういう活性の阻害が精製中のミトコンドリアに大してどの程度どのように影響するのかとかちょっと考えたらきりがないんですよ。なにかメソドロジーを集めた成書を探した方がいいようなきがしました。Method in Enzymologyとかでしょうか。。。それかCurrent protocolか。。。 んでもCurrent protocolの一部は見たことがあるんだよなぁ。。。

(無題) 削除/引用 No.967-4 - 2012/09/28 (金) 13:25:41 - 脂肪 あ、ちなみに私は入れてません。 最初に教わった人が別に入れなくていいよって言ってたので。 今まで特に困ったことはないです。 （気付いてないだけかも知れませんが・・・） 酸化防止すると何かいいことあるんでしょうかねぇ？ そもそもミトコンドリアって活性酸素だらけだと思うんですが。

(無題) 削除/引用 No.967-3 - 2012/09/28 (金) 12:56:05 - おお 酸化防止か、タンパクのSHの架橋が関係するかとどちらかなんでしょうけど、じゃあ何が酸化でまずいことになってとか、入れると何が影響されてどのような違いが出るのかというのが疑問なんです。きっといろいろキャラクタライズはしているだろうと推測しているのですが。最初は用心のために入れておいたけど、入れる必要がないと後で気付いたという程度なんでしょうかねェ。

(無題) 削除/引用 No.967-2 - 2012/09/28 (金) 11:44:26 - 脂肪 単に酸化防止では？ 私もきちんと成文を読んだわけではないですが。

ミトコンドリアの精製 削除/引用 No.967-1 - 2012/09/28 (金) 04:54:32 - おお ミトコンドリアの精製ミトコンドリアの精製でDTTを入れている方法と、入れていないものがみうけられますが、それに関して何かご存じの方はいらっしゃいますでしょうか? もちろんDTTはS-S結合を外したりする試薬ですが。。。チューブリン、アクチンなどS-S結合したりするという報告もありますが、そういうのを除くんだったら入っていた方がいいのかなぁとか思ったりもします。。。

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