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(無題) 削除/引用 No.962-6 - 2012/09/26 (水) 00:05:57 - まさ Harmoniaさま モモさま ２つのアレルを潰さなくてはいけないので手間がかかるとのこと、大変わかりやすく、納得がいくご回答をありがとうございました。 小言幸兵衛さま なるほど鳥類が由来ですからGCは確かに相同組替え効率をあげますね。 みなさま本当にありがとうございました。 またもう少し調べてみます。

(無題) 削除/引用 No.962-5 - 2012/09/25 (火) 21:58:36 - モモ NHEJです・・・

(無題) 削除/引用 No.962-4 - 2012/09/25 (火) 21:56:54 - 小言幸兵衛 DT40で相同組換えの頻度が高いのは、Ｂ細胞の抗体遺伝子で高頻度で起こるgene conversionのための機構が使われるからではないでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.962-3 - 2012/09/25 (火) 21:48:18 - モモ ノックアウトを作るのは時間も手間もお金もかかるので、そこまでしないんじゃないでしょうか？細胞作るだけで半年もかかるんではねぇ。 人の細胞でもHCT116なんかは良くノックアウトが作られてますよね。 NEHJを一時的に抑えることでノックアウトを作る効率がよくなるっていう論文もあった気が。

(無題) 削除/引用 No.962-2 - 2012/09/25 (火) 21:36:58 - Harmonia DT40でなぜ遺伝子ノックアウト効率が高いのかは分かりません。 一方、常の培養細胞でノックダウンが多いのは、お手軽さからだと 思います。遺伝子を完全にノックアウトするには、父方母方両方の 遺伝子をノックアウトしなければいけませんので、片方をつぶして、 その後でもう片方をつぶす、という手順になります。 ノックダウンでは、遺伝子の産物をたたくので、それこそマルチコ ピーの遺伝子でも、設計しだいで１回でノックダウンできますので。 DT40では、１回の操作で、父方母方両方の遺伝子をノックアウトで きるのですか？

DT40以外の細胞で相同組替えはなぜ起こしにくいのか？ 削除/引用 No.962-1 - 2012/09/25 (火) 20:06:35 - まさ みなさん教えてください。 現在、ターゲティング技術について勉強中の浅学者です。 KOマウスを作製する際に、targetingコンストラクトとゲノムとの間で相同組替えを起こさせるかと思います。 しかし、通常の培養細胞で遺伝子の機能を調べるにはほとんどがRNAiによるノックダウンかと思います。なぜ、ノックアウトはやられないのでしょうか？ DT40を使うとノックアウトしやすいのはなぜなのでしょうか？ 稚拙な質問で恐縮ですが、どうかヒントだけでもご教示いただけませんでしょうか？

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