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Endo-H (NEB)の保存温度 トピック削除
No.9612-TOPIC - 2021/04/12 (月) 22:48:38 - ENDO-H
ご助言いただけたら幸いです。

NEBからEndo-Hを購入しましたが、保存温度が書かれてなく、他の酵素と同様、-20度で保存したところ凍結してしまいました。

Glycerol-freeと書かれてありましたので、-20度で凍ってしまったのだと考えています。
それであれば4度保存で長期間の保存(数ヶ月)は問題ありませんでしょうか?

ご助言いただけましたら幸いです。
 
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No.9612-8 - 2021/04/17 (土) 00:53:48 - ENDO-H
皆さま、ありがとうございます。
分注して対処したいと思います。

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No.9612-7 - 2021/04/13 (火) 13:25:14 - PE
NEBのEndo-Hを日常的に使ってます。
-20℃だと確実に凍りますが、10μLずつぐらいに分注して余った分も再凍結してますが大丈夫そうです(活性を図ってるわけではなく感覚的ですが)。

(無題) 削除/引用
No.9612-6 - 2021/04/13 (火) 10:44:02 - toto
いまのNEBのEndoHはグリセロールを含んでいません。これは処理後にHPLCなどにかけることができるようにということです。それで、これは−20度で凍るので、分注保存するしかないです。さすがに凍結融解繰り返すと失活します。

(無題) 削除/引用
No.9612-5 - 2021/04/13 (火) 01:19:07 - ENDO-H
おお先生

ありがとうございます。
アドバイス感謝いたします。

(無題) 削除/引用
No.9612-4 - 2021/04/13 (火) 00:29:37 - おお
ラボの研究の対象の酵素を精製して凍結して保存していることは多々あると思いますし、凍結=悪いというものでもありません。制限酵素なんかもドライアイス中で凍結することもあって、メーカーは想定済みです。

4度保存でどれくらい持つか、凍結融解がどれくらい繰り返せるかは私はメーカーではないのでわかりませんが、気になるなら分注するなりすることはありだと思います。

私は多分1度だけ使ったことがありますが、受け取ったあとー20で保存して、融解して使ったと思います。悪い印象はなかったです。

メーカーに問い合わせるか、使用経験の豊富な人が見てコメントするかもしれないのを待つか、Endo-H精製などをしている論文を探して読むか、といったところでしょうか。

よく基質として使われているものをポジコンにおく手はあるかもしれません。またメーカーにロットで苦情があるか確認してもらい、違うロットを送ってもらえるか聞いてみてもいいかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.9612-3 - 2021/04/13 (火) 00:09:30 - ENDO-H
おお先生

ありがとうございます。
-20度との記載、見逃していました。

ただ-20度で凍結してしまったのですよね...実は酵素活性を疑うデータが出たので、やはり凍結融解がまずかったかなと思っています。といっても2度ほど繰り返しただけなのですが。。

4度で保存可能なのでしょうかね...

(無題) 削除/引用
No.9612-2 - 2021/04/12 (月) 23:46:22 - おお
NEB # Stored at (°C)
P0702S -20

https://www.neb.com/products/p0702-endo-h#Product%20Information_Reagents-Supplied

Endo-H (NEB)の保存温度 削除/引用
No.9612-1 - 2021/04/12 (月) 22:48:38 - ENDO-H
ご助言いただけたら幸いです。

NEBからEndo-Hを購入しましたが、保存温度が書かれてなく、他の酵素と同様、-20度で保存したところ凍結してしまいました。

Glycerol-freeと書かれてありましたので、-20度で凍ってしまったのだと考えています。
それであれば4度保存で長期間の保存(数ヶ月)は問題ありませんでしょうか?

ご助言いただけましたら幸いです。

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