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(無題) 削除/引用 No.9606-5 - 2021/04/09 (金) 13:11:05 - yuragi 皆さんありがとうございます。 1000μチップでピペッティングはしていたのですが、もっと小さい口のもの、200μチップやシリンジなどは盲点でした！ありがとうございます。 0.25%トリプシンで1時間ほど処理をかけたことがあります。 TSさんのおっしゃる通り細胞障害が怖いのと、30分ごろからあまり様子が変わらないように思えたのであまり時間は考慮していなかったのですが、もっと長時間かけても大丈夫なものなんでしょうか。ヒトやマウスなどだと何時間単位で処理しているのをザラに見るので...。

(無題) 削除/引用 No.9606-4 - 2021/04/09 (金) 08:30:22 - TS 18-20Gとかのシリンジを通すとかもやりますね。これも消化後に。 あとは、トリプシンとかは長時間処理すると細胞に障害が出ると思うので、 もう少し優しいやつで長くやってみるとかは試されましたか。 TrypLE™ Express とかも使われますよね。

(無題) 削除/引用 No.9606-3 - 2021/04/09 (金) 05:50:55 - おお >Single cellにするため２００ulのチップを通すとか、,,, あ、もちろんトリプシンやコラゲナーゼで処理し、メッシュ後のはなしです。

(無題) 削除/引用 No.9606-2 - 2021/04/09 (金) 03:13:17 - おお 魚の上皮細胞はあつかったことはありませんが、Single cellにするため２００ulのチップを通すとか、先を火でなめして細胞を傷つけないようにしたパスツールピペットでゆっくり吸い出ししてばらすとかいう事はあります。

上皮細胞の分離について 削除/引用 No.9606-1 - 2021/04/08 (木) 10:50:42 - yuragi 魚の上皮細胞を分離して、細胞一つ一つをセルソーターで評価しようと思っています。 分離についてなのですが、トリプシンやコラゲナーゼで処理した後金属メッシュでこすなどしましたが細胞塊が多く今ひとつです。 何か良い酵素やそれの条件、酵素処理以外のやり方(超音波や磁気ビーズなど)がありましたらご教授いただけませんでしょうか。

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