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HAD(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase)活性測定について トピック削除
No.9558-TOPIC - 2021/03/05 (金) 10:59:36 - in4grade
β酸化能の評価として、HAD(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase)活性測定を行っています。HAD測定試料とNADHとAcetoacetylCoAをReaction buffer内で反応させ、NADHの340nmでの吸光度変化でHADの活性を測定しています。ここで疑問なのですが、HADは通常のβ酸化の経路では3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenaseから脱水素反応を起こし、NAD+をNADHに変換するものだと認識しています。
今回の測定系で反応物と考えている、NADHやAcetoacetylCoAを加えその変化を測定しているのはなぜでしょうか。逆の気がするのですが。
素人のような質問で申し訳ありません。
 
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(無題) 削除/引用
No.9558-3 - 2021/03/05 (金) 15:48:27 - おお
逆でなぜだめなのかを自身で考えてみてください。

その上で、基質の手に入りやすさ(値段なども含めて)を考慮した場合、どちらがやりやすいですか?

(無題) 削除/引用
No.9558-2 - 2021/03/05 (金) 12:01:04 - ぢrt
なぜ自分で測定系を選んでいるのに理由を聞くのか?
別にforward reactionの活性を調べたいなら、対応する基質と補酵素で系を組めばいいだけでは??

HAD(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase)活性測定について 削除/引用
No.9558-1 - 2021/03/05 (金) 10:59:36 - in4grade
β酸化能の評価として、HAD(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase)活性測定を行っています。HAD測定試料とNADHとAcetoacetylCoAをReaction buffer内で反応させ、NADHの340nmでの吸光度変化でHADの活性を測定しています。ここで疑問なのですが、HADは通常のβ酸化の経路では3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenaseから脱水素反応を起こし、NAD+をNADHに変換するものだと認識しています。
今回の測定系で反応物と考えている、NADHやAcetoacetylCoAを加えその変化を測定しているのはなぜでしょうか。逆の気がするのですが。
素人のような質問で申し訳ありません。

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