全7件 ( 1 〜 7 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.955-7 - 2012/09/23 (日) 00:10:26 - 昔買った 4G10抗体はミリポア社から購入すればポジコンがついていると思います。 抗体の品質をチェックできるので便利です。 今もついているかわかりませんが。

(無題) 削除/引用 No.955-6 - 2012/09/22 (土) 22:21:38 - 小言幸兵衛 こんな論文もあります。 The 4G10, pY20 and p-TYR-100 antibody specificity: profiling by peptide microarrays. N Biotechnol. 2012 Jun 15;29(5):571-7. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22178400

(無題) 削除/引用 No.955-5 - 2012/09/21 (金) 19:48:43 - abc レスありがとうございます。 私の研究分野では殆どが4G10を使っているのです。 私も当初は同じ抗チロシンリン酸化抗体ならば、と あまり気にせずに、価格の安いPY20を使用していたのですが、 うまくいかず、ひょっとしたら、 従前の4G10抗体を使用すれば 改善するのでは、と考えた次第です。

(無題) 削除/引用 No.955-4 - 2012/09/21 (金) 18:34:32 - biochem PY20は結構くせ者ですよ。 私も昔PY20を使って論文を書いていますが、抗体を当てる条件をかなり検討してようやく再現性の ある条件を得られました。 塩濃度やblocking剤、もちろん標的蛋白質もそうですが、最適条件を見つけてください。 ここの過去スレにも膨大なPY20の情報があるはずです。私も参考にしました。

(無題) 削除/引用 No.955-3 - 2012/09/21 (金) 16:26:19 - おお 非特異ってどのような判断でしょうか、、、ライセーとを流すと色々なバンドが見られますが、どれが非特異か判断はできないでしょうし、IPした物を検出するにしても(なにかひと工夫しないと)、いろいろなたんぱく質がコンプレックスとして落ちてくるでしょうしその中に燐酸化された物があっても不思議でないでしょうし。 再現性がないというのは抗体が原因であるとするのに十分な判断材料はありますでしょうか。うまく行ったと思える時のサンプルをポジコンとして流したりするのも原因解明に有用な情報を得ることができる方法だと思います。PY20は数えるほどしか使ってませんが、サンプルのアルカリフォスファターゼ処理でほとんどのシグナルが消えたか弱くなったので概ね良好と思っています。ここのタンパクに対してとなると話が違ってくるかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.955-2 - 2012/09/21 (金) 16:04:28 - abc すいません。情報を加えます。 用途はWBです。ポジコンとして リン酸化が亢進する条件で反応させても、 うまくいったり、いかなかったりすることが あるということです。 非特異が多いことも悩みの種です。

チロシンリン酸化抗体 削除/引用 No.955-1 - 2012/09/21 (金) 15:36:48 - abc チロシンリン酸化抗体として現在PY20由来のものを使用しているのですが、 いまいち再現性が取れません。 有名なものは4G10由来のものだと思うのですが、 4G10をお使いの方、PY20と比べて、 抗体の反応性等のご情報をお持ちでしたら 教えていただけませんでしょうか？

全7件 ( 1 〜 7 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---