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MTTホルマザンは沈殿しますか?
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No.9533-TOPIC - 2021/02/22 (月) 18:32:29 -
留年しそう
MTTアッセイをしています。
1.5mlチューブにサンプルとDMSOをいれてホルマザンを溶解させ、96ウェルプレートに溶液を移す際、遠心をしています。
細胞片が浮かんでいるのでそれを96ウェルへ入れないようにするためです。
1200rpm(140×g)、3分ほど遠心してますが、ふと遠心しすぎるとホルマザンも沈殿して薄まってしまうのではないかと思いました。
質問:MTTホルマザンは上記程度の遠心で沈殿することはありますか?
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No.9533-3 - 2021/02/22 (月) 18:50:51 - おお
きちんと溶けていれば沈殿しないと思いますが。に沈殿しているようであれば完全に溶解しきれてないでしょう。非常に溶けにくいのも事実です。96Wellプレートで培養して、そこにMTTを加えて最後にSDSや有機溶媒を直接96Wellプレートに加えて、溶解したら直接プレートリーダーで測ることもあります。この場合は細胞片があるかどうかは置いといてそういうのを除く作業すらしません。
(無題)
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No.9533-2 - 2021/02/22 (月) 18:40:20 - drftゆい
DMSOできちんと溶解されていれば沈殿しません。沈殿するようならば仮にしたとしても全体のごく一部です。
MTTホルマザンは沈殿しますか?
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No.9533-1 - 2021/02/22 (月) 18:32:29 -
留年しそう
MTTアッセイをしています。
1.5mlチューブにサンプルとDMSOをいれてホルマザンを溶解させ、96ウェルプレートに溶液を移す際、遠心をしています。
細胞片が浮かんでいるのでそれを96ウェルへ入れないようにするためです。
1200rpm(140×g)、3分ほど遠心してますが、ふと遠心しすぎるとホルマザンも沈殿して薄まってしまうのではないかと思いました。
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