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iPS細胞培養中の選択 トピック削除
No.9456-TOPIC - 2021/01/28 (木) 16:20:08 - iPS細胞
iPS細胞の培養でpuromycinを使って細胞を選択する時、
1ug/mLの濃度で添加した場合細胞って何日くらいで死んでいきますか?
添加してO/Nくらいでもうコロニーはがれたりしてますかね?
 
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(無題) 削除/引用
No.9456-2 - 2021/01/29 (金) 15:18:09 - おお
>コロニーはがれたりしてますかね?
ってどういう意味かわかりませんけど、耐性の細胞はピューロ存在下で生存できるわけだし。48時間で選択が完了するとも言われている切れのある薬剤だけど。iPSは経験ないけど、一日でどっと死んでいくような経験はあります。ただし、使う細胞が3日、4日かけて死んでいくような濃度を選択したほうがいいと言う記述もあります。ピューロ耐性遺伝子のプロモーターや組み込まれるメカニズムなどによってもベストの濃度が違うのかもしれません。
まずはどれくらいの濃度が適切か導入する前の細胞で探ってみてもいいかもしれません。

iPS細胞培養中の選択 削除/引用
No.9456-1 - 2021/01/28 (木) 16:20:08 - iPS細胞
iPS細胞の培養でpuromycinを使って細胞を選択する時、
1ug/mLの濃度で添加した場合細胞って何日くらいで死んでいきますか?
添加してO/Nくらいでもうコロニーはがれたりしてますかね?

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