Bio Technical フォーラム

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ラットの末梢血単球の培養 トピック削除
No.9408-TOPIC - 2021/01/04 (月) 08:19:48 - 院生N
いつも勉強させていただいる、初心者です

ラットのPBMCからマクロファージを分化させる培養をしているのですが、うまくいきません。

全血液を心腔採取して、FicollでPBMC層を分離、PBMCをディッシュに接着させて10%FBSとGMCSF 100U/mlで培養しています。

ヒトだとこの方法で、7日間培養でしっかり単球がマクロファージへ増殖しつつ分化するのですが、ラットの場合ですと、培養開始翌日にはほとんど接着面からはがれてしまいます。

もしおお詳しい方などいましたら、アドバイスなどいただけますとありがたいです。

よろしくおねがいします。
 
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(無題) 削除/引用
No.9408-2 - 2021/01/04 (月) 22:49:06 - szxdcfgvbひ
フィコールなどの密度勾配遠心は組成や遠心条件がヒトとマウス・ラットでは結構違っていたように思うので『ヒトだとこの方法で』いい感じにいけてても、「ラット場合だと」適切でないような気がしてがちょっと気になる。

ラットの末梢血単球の培養 削除/引用
No.9408-1 - 2021/01/04 (月) 08:19:48 - 院生N
いつも勉強させていただいる、初心者です

ラットのPBMCからマクロファージを分化させる培養をしているのですが、うまくいきません。

全血液を心腔採取して、FicollでPBMC層を分離、PBMCをディッシュに接着させて10%FBSとGMCSF 100U/mlで培養しています。

ヒトだとこの方法で、7日間培養でしっかり単球がマクロファージへ増殖しつつ分化するのですが、ラットの場合ですと、培養開始翌日にはほとんど接着面からはがれてしまいます。

もしおお詳しい方などいましたら、アドバイスなどいただけますとありがたいです。

よろしくおねがいします。

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