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抗体のアプリケーションについて トピック削除
No.9400-TOPIC - 2020/12/30 (水) 04:24:21 - RNA
お世話になります。
一点確認させてください。

抗体を買おうとしていて、そのデータシートには

Immunohistochemistry 1:50 - 1:200
Immunohistochemistry-Paraffin 1:50 - 1:200

と書かれてありました。

ImmunohistochemistryとImmunohistochemistry-Paraffinの違いはなんでしょうか?
前者は凍結切片ではないです。

私はDABを使った免疫化学染色はしたことがなく、いつも凍結切片かパラフィン切片での免疫蛍光染色ばかりです。今回購入を検討している抗体は上記のアプリケーションですが、これはパラフィンの免疫””蛍光””染色でワークすることを保証していますでしょうか?
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.9400-10 - 2020/12/30 (水) 22:59:47 - RNA
皆様、ありがとうございました。
はい、み様のおっしゃられる通りです。
早速蛍光方法で試してみます。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.9400-9 - 2020/12/30 (水) 21:38:17 - 定義は
ホントに解らない質問だ

蛍光標識第二抗体と組み合わせて使う、
第一抗体と想像しているけど、そうとは限らないし。

もっともっと具体的に、、、、

(無題) 削除/引用
No.9400-8 - 2020/12/30 (水) 18:42:46 - み
> > Immunohistochemistry 1:50 - 1:200
> > Immunohistochemistry-Paraffin
>
> パラフィンでワークするということはDAB法を使わなくても、蛍光標識の二次抗体を使ってもワークすると考えてもいいのかどうかをお聞きしたかったです。
> 非常にわかりずらい文章で申し訳ありません。


データシートの記載では免疫染色に50-200倍で使えて、パラフィン切片でも可能。
素直に考えたら生の組織を凍結切片で作製したものは抗原がマスクされてない確率が高いから抗体の反応性は保持され易い。普通は凍結切片を固定して染色するけど、それで反応しなかったとしても抗原賦活化の検討も可能なので可能性は広がる。

しかし、質問者はこのような点を聞きたいのではなく、DABでなくても蛍光染色も可能なのかと言っているようだ。
HRP標識の二次抗体でDAB発色するか、蛍光標識の二次抗体で蛍光を検出するかの違いによるから、どちらか片方がworkすれば他方も可能でしょう。つまり一次抗体の質がDABと蛍光の検出方法の嗜好性に影響を与えるわけではないということ。
勿論、パラフィンの場合は二次抗体以外に由来する蛍光の排除を気に留めないといけないが。

(無題) 削除/引用
No.9400-7 - 2020/12/30 (水) 18:12:53 -  vbんjkm
それを書いたメーカーに聞いてください。それを書いた人にしかわかりません。

(無題) 削除/引用
No.9400-6 - 2020/12/30 (水) 18:03:32 - 定義は
たぶん大丈夫

蛍光顕微鏡なのか、共焦点顕微鏡なのかにもよるけど。

抗体なんて、この程度のものと割り切って。

使えるときは、メーカー推薦濃度の千分の1以下でも十分

(無題) 削除/引用
No.9400-5 - 2020/12/30 (水) 14:02:08 - RNA
定義は様

私の書き方が不適切でした。

> Immunohistochemistry 1:50 - 1:200
> Immunohistochemistry-Paraffin

パラフィンでワークするということはDAB法を使わなくても、蛍光標識の二次抗体を使ってもワークすると考えてもいいのかどうかをお聞きしたかったです。
非常にわかりずらい文章で申し訳ありません。

(無題) 削除/引用
No.9400-4 - 2020/12/30 (水) 13:30:38 - 定義は
求める保証の定義は何ですか?

(無題) 削除/引用
No.9400-3 - 2020/12/30 (水) 10:40:30 - RNA
?様

お礼を書き損じた記憶はありませんが、もし該当するトピックがありましたら、お手数をおかけしますが、教えてくださいますと幸いです。

(無題) 削除/引用
No.9400-2 - 2020/12/30 (水) 09:43:50 - ?
同一人物かどうか知らないが、
先に別の質問して回答もらったら、、感謝のべたら。

自分で試行錯誤、保証はあぬ。

抗体のアプリケーションについて 削除/引用
No.9400-1 - 2020/12/30 (水) 04:24:21 - RNA
お世話になります。
一点確認させてください。

抗体を買おうとしていて、そのデータシートには

Immunohistochemistry 1:50 - 1:200
Immunohistochemistry-Paraffin 1:50 - 1:200

と書かれてありました。

ImmunohistochemistryとImmunohistochemistry-Paraffinの違いはなんでしょうか?
前者は凍結切片ではないです。

私はDABを使った免疫化学染色はしたことがなく、いつも凍結切片かパラフィン切片での免疫蛍光染色ばかりです。今回購入を検討している抗体は上記のアプリケーションですが、これはパラフィンの免疫””蛍光””染色でワークすることを保証していますでしょうか?
よろしくお願いします。

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