けいだいをかさねた細胞は効率が悪くなってくるのはありますが、それはかい方にもよるかもしれませんが2ー3ヶ月という人もいます。TFの効率とどのような関係があるのかはおいておいて、けいだいを重ねていくと、そのうち増殖速度がかわってきて(はやくなるのがたいてい)、細胞が小さくなってきたりとか形態の変化もともないます。たいていの場合はそういうのとTF効率の悪化は並行して起こるような印象です。細胞を使う時にある程度増殖させてなるべく多くの細胞を凍結して置く方がいいかと思います。けいだいのかいすうからして、そんなに問題がおこりそうな回数でもないとはおもいますよ。ただしけいだいのしかたがらんぼうだとすぐへんになるかもしれません。とくにTFようにまいたさいぼうのじょうたいがまいかいちがうとかだとまいかいかなりばらつきがでるかもしれません。
あまり起こってほしくないものとして、マイコプラズマ感染などもあります。そういう細胞は直ぐに変になるか、気がつかないで買っていて突然変になることがおおいです。
あとは血清のロットの影響も無視できないことがあるかもしれません。
変になるとなかなかとらえどころがないので、最初にどれだけ準備が整えられるかというのもあるかもしれませんね。たとえば、ほかの細胞でTFしたことがあるなら、その細胞でも効率が変わっているか確かめることで何処が問題か炙り出し易いかもしれません。
DNAは電気えいどうでだいじょうぶなら、DNA自身はもんだいないとおもいます。
TFのあとのさいぼうの調子はどうですか? |
|
このスレッドをはてなブックマークに追加