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ウイルス感染細胞の保存方法 トピック削除
No.9297-TOPIC - 2020/11/11 (水) 12:24:54 - 舞妓
いつも勉強させて頂いております。

ヒトB細胞をEBV感染させ不死化しました。
この不死化細胞はEBVに感染しているので、EBVを産生していると思うのですが、
このようなウイルス感染細胞は皆様どのように保存していますか。

マイコプラズマ感染細胞を液体窒素の液相で保存すると、別のチューブに入っている細胞にも感染すると聞いたことがあります。本当かどうかは分かりませんが。
EBVはマイコプラズマより小さいので、液相で保存すると他の細胞にも感染してしまうのかなと思っているのですが、気にしすぎでしょうか。

気相で保存できるタンク、あるいは超低温槽を購入することも検討しております。
皆様のご意見お待ちしております。
 
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No.9297-6 - 2020/11/12 (木) 22:52:55 - 舞妓
皆様、大変有益なご助言有難うございました。
便利な物が売られているのですね。
また、EBVが潜伏感染とのことで安心いたしました。
不死化B細胞を扱うときに恐る恐る扱っていましたが、
そこまで怖がる必要もないようですね。
有難うございました。

(無題) 削除/引用
No.9297-5 - 2020/11/12 (木) 09:00:37 - mp
LCLではEBVは潜伏感染状態なのでウイルスは産生していません。何らかのストレスにより溶解感染に移行することはありえますが、それもごくごく少量と考えられます。これがバイアルから漏れて、液体窒素中の他のバイアルに移行して感染が成立することはまずないといっていいのではないでしょうか。そもそもEBV自体、そんなに簡単に培養細胞に感染はしないと思います。

(無題) 削除/引用
No.9297-4 - 2020/11/12 (木) 01:43:42 - おお
glass ampouleをつかえば周りへの影響をあまり気にしなくてもいいとは思います。どの程度普及しているのかよくわかりませんが。
ATCCから購入するとglass ampouleできますよね。
https://opsdiagnostics.com/notes/ranpri/rpcryoprescell.htm

(無題) 削除/引用
No.9297-2 - 2020/11/11 (水) 21:17:08 - Define
基本は他と混ざらないようにしつつ密閉して-150℃の超低温槽保管ですね。
1年以内で使い切るなら-80℃もありえます。
やむをえず液相保存するなら、
めんどくさいですがCryoFlexで密閉したほうがいいでしょう。

ウイルス感染細胞の保存方法 削除/引用
No.9297-1 - 2020/11/11 (水) 12:24:54 - 舞妓
いつも勉強させて頂いております。

ヒトB細胞をEBV感染させ不死化しました。
この不死化細胞はEBVに感染しているので、EBVを産生していると思うのですが、
このようなウイルス感染細胞は皆様どのように保存していますか。

マイコプラズマ感染細胞を液体窒素の液相で保存すると、別のチューブに入っている細胞にも感染すると聞いたことがあります。本当かどうかは分かりませんが。
EBVはマイコプラズマより小さいので、液相で保存すると他の細胞にも感染してしまうのかなと思っているのですが、気にしすぎでしょうか。

気相で保存できるタンク、あるいは超低温槽を購入することも検討しております。
皆様のご意見お待ちしております。

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