全7件 ( 1 〜 7 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.9283-7 - 2020/11/08 (日) 09:48:57 - qq やってみると悪くなかったという経験だけです。 HEPES-NaでCO2フリーで培養する件は、昔のJCRBのウェブページに高岡先生の記述があります。（　cellbank.nibiohn.go.jp/legacy/indexpractice.htm　の、培地の話＞CO2の意味、CO2トリック、AH601）たいそう古い話です。 5%CO2環境であれば、＋炭酸水素ナトリウムでもHEPES-Na緩衝液入りでもpH維持に大きな問題はないだろうと思います。 5%CO2環境でHEPESオンリーだと、指摘されるような問題が発生しそうだとも思います。それと同じこと（というか逆のこと）が、CO2なしの環境に晒すと発生しそうだなと、思いませんか？ 私は、以下の一点に尽きると思います。 つまり、pHを測定すれば済むことですから、使用者さんが実測して決定すれば良いことだと思いま。 質問者さんは、調整済みのボトル培地ではなく炭酸水素ナトリウム不含の培地をご使用でしょう。粉末培地を使っているのであれば、pHは最初弱酸性になっていると思います。そのままHEPES-Na添加だと、pHを上げるのに大変かもしれません。炭酸水素ナトリウムを使わないのであれば、NaOHか何かである程度pHを戻したところに、HEPES-Naを入れる方が良いと思います。

(無題) 削除/引用 No.9283-6 - 2020/11/08 (日) 06:07:40 - おお >[Re:5] qqさんは書きました : > HEPES単独の方が良いような気がします。 なにかこれに関して具体的な説明があれば聞かせてもらえませんか？ 反論する機会をもらえるとするならば細胞が放出する乳酸に対応できるようCO2の溶存量が変化するバッファー系を使っているのかと。なのでCO2を使わない培地では乳酸の放出量を抑えるためグルコースのかわりにガラクトースを使ったりします。 培養する長さ、細胞の性質などで使える培地の幅が変わるかもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.9283-5 - 2020/11/07 (土) 09:33:45 - qq HEPES単独の方が良いような気がします。 培地にCO2が入らないように、安めの培養フラスコであれば蓋を密閉しますし、ディッシュであれば濡れティッシュを入れたタッパーで培養します。 おおさんの指摘の通りですが、逆にCO2が0.1%未満の環境にさらしたときに、培地中のCO2が当然抜けていくだろうと思うのだけど、結果的にアルカリ化するのではないかな？と思います。 まあ心配なのだろうから、使う人が実測されるのが一番でしょう。 フェノールレッドの色（吸光度測定もあり）で判断しても構わないと思います。

(無題) 削除/引用 No.9283-4 - 2020/11/07 (土) 00:30:18 - おお >[Re:3] Aさんは書きました : > ヘペスオンリーで十分 CO2インキュベーター内ではCO2の吸収によりHEPESだけではpHの維持が難しいと思うのですが。Live イメージングに使うようなIncubator外で使う培地は、CO2インキュベーターで使うとたちまちpHが酸性になって使えないとも言われてます。 それにHEPES、炭酸両方入った培地が売ってますし。

(無題) 削除/引用 No.9283-3 - 2020/11/06 (金) 19:21:58 - A ヘペスオンリーで十分

(無題) 削除/引用 No.9283-2 - 2020/11/06 (金) 13:26:39 - おお HCO3 and HEPES

培地にHEPES 使いたいです 削除/引用 No.9283-1 - 2020/11/06 (金) 10:00:41 - BCG 炭酸緩衝系だとpHの変化の制御がうまくいかない実験やるんで、HEPESで培地のpHをコントロールしたいです。でもCO2インキュベータで培養したいです。そういう時、重炭酸ナトリウムは入れるのでしょうか。HCO3 and HEPES か HCO3 or HEPESのどちらが良いのでしょうか。

全7件 ( 1 〜 7 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---