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(無題) 削除/引用 No.9265-7 - 2020/10/30 (金) 22:50:52 - 無名 私も器具のオートクレーブはしないです。 オートクレーブは蒸気で汚れるので。 フィルターチップである必要を感じないなら、ワトソンからバルクのチップとチューブを買って、袋から直前使ったほうがきれいです。

(無題) 削除/引用 No.9265-6 - 2020/10/30 (金) 13:20:52 - intesti 皆様ご回答ありがとうございました。 実験内容によって、市販のクリーンな製品とラボでオートクレーブするものを使い分けるべきですね。

(無題) 削除/引用 No.9265-4 - 2020/10/30 (金) 09:43:50 - 774 そもそもオートクレーブする目的としてDNAの分解ではなくてDNaseの失活が一般的ではないですかね。 だからnuclease freeの製品を適切に使用しているなら、PCR等の用途でオートクレーブは不要。

(無題) 削除/引用 No.9265-3 - 2020/10/30 (金) 00:13:58 - おお オートクレーブでは分解できると思わないほうがいいとおもう。かえってコンタミをまねく恐れがあるでしょう。

(無題) 削除/引用 No.9265-2 - 2020/10/29 (木) 16:57:41 - SYBR master オートクレーブによって、DNAは断片化されますがPCRで検出可能です。長さ的にはおおよそ100-500 bp程度と記憶しています。文献的には、たしかサイトメガロウイルスの検出で、コンタミが頻繁に起きた原因を調べたところ、感染培養細胞を廃棄滅菌するために使用していたオートクレーブから排出される水蒸気だったというのがありました。オープンラボで起きた物で、PCRベンチの裏にオートクレーブが設置されていたらしいです。 自分のラボで手詰めするチップは、基本的には環境中のDNAコンタミは防げないと考えています。原因は手袋等を付けても、チップやチューブ表面に静電気が発生し、それが環境中に浮遊しているDNAを引きつけて付着させます。まあ、1〜10分子とかsingle cellの研究をやりたいなら、大問題にはなるでしょうが、どの程度のコピー数まで検出したいのかの感度の問題にはなるとは思います。現在96本ケース入りの物は、無人化されたクラス100程度のクリーンルーム中で機械でつめられています。 ちなみに調理された食品でもDNAは検出できます。FRED Assay Kitで調べてきてください。

オートクレーブとDNA分解 削除/引用 No.9265-1 - 2020/10/29 (木) 15:13:58 - intesti オートクレーブによってDNAはどの程度分解されるのでしょうか？ 分子生物学的実験に使う器具や緩衝液は、よくオートクレーブされた後に使用されていますが、 それがどの程度クリーンなものなのか気になり質問させて頂きました。 例えば、PCRやシークエンスに用いるチップ等を箱に詰める際に環境中のDNAがコンタミすることが考えられますが、オートクレーブをすれば、これらDNAは分解し実験に全く支障がないレベルになるのでしょうか？ 経験的には、オートクレーブ済みの器具によって何か実験に支障をきたすような問題が起きたことはないのですが、それが「全く支障をきたさない」と言えるのかが気になりまして… 詳しい方がいたらご回答いただけると幸いです。

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