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(無題) 削除/引用 No.9206-2 - 2020/10/07 (水) 21:56:14 - qq あげ足を取っているのではないのですが、 ＞プラスミドを導入した遺伝子そのものが、 これが理解できないです。書き間違えであれば訂正してください。 ＞経時的にどの程度残存しているかを、 ＞ゲノムに対するリアルタイムPCRを実施する計画です。 ここも何をしたいのか判然としないです。 単に細胞にトランスフェクションして、どの程度DNAが取り込まれていて、経時的に消失していくかを知りたいということでしょうか？？ そうだとすると、選択肢とつながるのかなぁ？

リアルタイムPCR　検量線　 削除/引用 No.9206-1 - 2020/10/07 (水) 20:13:58 - まなと プラスミドを導入した遺伝子そのものが、経時的にどの程度残存しているかを、ゲノムに対するリアルタイムPCRを実施する計画です。 コントロールはGAPDHの予定です。ゲノムで実施する場合、GAPDHの検量線をどのように作成するのか良いのか、ご教授ください。 質問１．以下のどちらが良いでしょう？ １）GAPDHに対するPCRを実施して、そのPCRプロダクトをアガロースゲルから切り出して、それを定量、希釈して検量線を作成する。 ２）プラスミドにGAPDHの一部を挿入して、それを利用して検量線を作成する。 質問２．PCRの条件をそろえるために、検量線のそれぞれの検体にバックグラウンドとなる核酸を加えて、最初のゲノムの濃度をそろえるべきだと思うのですが、何を加えればいいのでしょう？それとも必要ない？ 以上、初心者で申し訳ありませんが、よろしくお願いします。

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