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プロモーターが同じトランスジェニックマウスの交配 トピック削除
No.9164-TOPIC - 2020/09/17 (木) 19:10:49 - ういえ
細胞特異的遺伝子発現マウスに関して質問させてください。

遺伝子Aのプロモーターの下流で遺伝子Bを発現するトランスジェニックマウスと、遺伝子Aのプロモーター下でCreを発現するマウスの交配を考えています。
(同時に、遺伝子CのFloxed Geneもあり、トリプルミュータントになります。)

遺伝子Aのプロモーターがかぶってしまうと、遺伝子Bの発現が落ちたり、Creの発現が落ちたりしますでしょうか。

発現が落ちるにしても、その程度はプロモーターに寄るところはあると思いますが、マウスの作成として避けるべきでしょうか?論文化の際にレビュアーから色々と突っ込まれうるでしょうか。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.9164-4 - 2020/09/24 (木) 11:06:42 - AA
Tg-遺伝子Aプロモーター-遺伝子B
Tg-遺伝子Aプロモーター-Cre
floxed-遺伝子C

のトリプルトランスジェニックということでしょうか。
効率悪そうだし交配をさっさと始められてはいかがかと思いますが、
気になるようであれば、各Tgや、交配過程でうまれるTgxTgのマウスで、
遺伝子Aの発現量を調べればいいと思います。

flox-遺伝子X
Tg-遺伝子Xプロモーター-tTA
Tg-Cre
safe harbor KI-TRE-遺伝子X

というマウスを使ったことありますが普通に機能していました。

(無題) 削除/引用
No.9164-3 - 2020/09/24 (木) 08:57:47 - ういえ
おおさま
すみません、返信遅くなりました。

今回検討しているマウスは、遺伝子AのKOにはなりません。
ノックインシステムでのトランスジェニックではなく、ランダムに挿入されるトランスジェニックマウスですので、内在性の遺伝子Aの発現は残っています。

ですので、
遺伝子Aのプロモーターは
#1.遺伝子Aの内在性発現
#2.トランスジーン遺伝子Bの過剰発現
#3.Creの発現
のために使われることになります。

#2,#3は人工的に挿入することになります。
遺伝子Aのプロモータが増えることで、
トランスジーン遺伝子Bの発現があまり高まらなかったり、Creの発現も不十分になったり、また内在性の遺伝子Aの発現も低下しないか、気にしているところです。

(無題) 削除/引用
No.9164-2 - 2020/09/19 (土) 01:57:12 - おお
これってもしかしたら遺伝子Aはノックアウトされている(機能しない)状態なんでしょうか?

プロモーターが同じトランスジェニックマウスの交配 削除/引用
No.9164-1 - 2020/09/17 (木) 19:10:49 - ういえ
細胞特異的遺伝子発現マウスに関して質問させてください。

遺伝子Aのプロモーターの下流で遺伝子Bを発現するトランスジェニックマウスと、遺伝子Aのプロモーター下でCreを発現するマウスの交配を考えています。
(同時に、遺伝子CのFloxed Geneもあり、トリプルミュータントになります。)

遺伝子Aのプロモーターがかぶってしまうと、遺伝子Bの発現が落ちたり、Creの発現が落ちたりしますでしょうか。

発現が落ちるにしても、その程度はプロモーターに寄るところはあると思いますが、マウスの作成として避けるべきでしょうか?論文化の際にレビュアーから色々と突っ込まれうるでしょうか。
よろしくお願いします。

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