Bio Technical フォーラム

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Real-time PCRの非特異 トピック削除
No.9131-TOPIC - 2020/09/02 (水) 14:10:58 - yyyy
現在、研究室でReal-time PCRの立ち上げを行っていますが、陰性（水)から非特異増幅産物と思われる弱いシグナルがでています。スレッショルドからだと陰性なのですが、こういったものはプライマープローブの濃度の調製やPCRの条件検討をして完全に消えるように条件検討されてますか？それともスレッショルドを超えなければ無視してますか？ご意見いただければ幸いです。
　
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(無題) 削除/引用
No.9131-2 - 2020/09/02 (水) 15:44:24 - AA
閾値からみて陰性と判断ということなので解析のじゃまにならないという前提ですが、解離曲線をみて明らかに非特異産物であるようなら無視します。

インターカレーターにしろ、クエンチャーにしろ、そういったバックグラウンドノイズは、原理上完全に消えることは無いんじゃないでしょうか。

Real-time PCRの非特異 削除/引用
No.9131-1 - 2020/09/02 (水) 14:10:58 - yyyy
現在、研究室でReal-time PCRの立ち上げを行っていますが、陰性（水)から非特異増幅産物と思われる弱いシグナルがでています。スレッショルドからだと陰性なのですが、こういったものはプライマープローブの濃度の調製やPCRの条件検討をして完全に消えるように条件検討されてますか？それともスレッショルドを超えなければ無視してますか？ご意見いただければ幸いです。
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