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(無題) 削除/引用 No.9115-2 - 2020/08/28 (金) 12:54:36 - toto 固定細胞で画像が撮れるということなので、おそらくブリーチに時間がかかりすぎていて、取得したときにはすでに多くの分子は拡散してしまっているのでしょう。ただそれでもROIでの輝度変化を調べると回復曲線に乗ると思います。zoomをなるべくかけてブリーチ領域を狭めればある程度改善するはずです。

イメージングFRAP実験について 削除/引用 No.9115-1 - 2020/08/28 (金) 12:17:45 - にん いつも勉強させていただいてます。 哺乳類培養細胞(HEKまたはHela)でFRAP実験を現在行うとしています。しかし、培養細胞でbleachをしても狙った領域の退色ができておらず、細胞全体の蛍光が退色しているような感じがします。固定細胞の標本ではbleachが狙った領域のみでうまく行くことを確認しているので、実際のイメージング中に使用している培地?の問題なのか不明ですが、光が拡散してしまっている?ようです。 何か解決策や原因などを教えていただきたいです。 ちなみに、見たい分子は既に他の論文でFRAPの結果がでているため、分子の移動速度の問題ではなさそうです。

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