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(無題) 削除/引用 No.9101-3 - 2020/08/25 (火) 05:18:38 - ちぇるしー M様 コメントあとうございます。大変参考になります。 やはりbで、例えばテットオンオフシステムの細胞を植えてDox投与後、ノックダウンされたと思われるときに薬剤投与がベストということでしょうか。 例えばbのとき、siRNAやshRNAでノックダウンした細胞を接種させたとき、そのノックダウン効果がネズミを2−3週間飼っている間に薄れていくのではないかという懸念もありますよね？ 免疫不全マウスにヒトがん細胞を植える予定です。aでやられるかたもいらっしゃるのですね？

(無題) 削除/引用 No.9101-2 - 2020/08/25 (火) 05:02:05 - M 自分なら(b)でやりますが、どうしても薬剤投与とノックダウンをシンクロしたい場合は、inducibleのノックダウンを入れると思います。腫瘍細胞がマウス由来の場合、(a)の腹腔や血管内投与で仮に十分なノックダウン効率が得られたとしても、腫瘍細胞以外にもノックダウンがおきてしまい、どの細胞での効果を見ているのか分からなくなりそうです。免疫不全マウスにヒトの癌細胞を植える場合は(a)でも大丈夫かもしれませんが、導入効率次第でしょう。

マウス実験手順について 抗腫瘍効果 ノックダウン 削除/引用 No.9101-1 - 2020/08/25 (火) 04:15:12 - ちぇるしー マウス実験の手順について質問させてください。 マウスに腫瘍細胞を皮下注入し、とある薬剤の抗腫瘍効果をみたいと思っております。このとき、腫瘍細胞のあるタンパクの発現を抑制すると薬剤の効果が高まる、という仮説をたてています。 この場合の大まかな実験手順は、 a) 腫瘍細胞を注入しグループを2つにわけ、片方のグループにsiRNAあるいはshRNAを腹腔(あるいは尾静脈?あるいは腫瘍?)内投与し、薬剤を投与してグループ間の腫瘍サイズを比較をする。 b) あらかじめ細胞培養の段階でノックダウンした細胞としていない細胞を培養し、それぞれをマウスに注入し、薬剤を投与して腫瘍の増殖サイズを比較する。 通常どちらが行われるでしょうか？まだ細かな計画は立てておりませんがざっくりとした流れを考え中です。よろしくおねがいします。

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