Bio Technical フォーラム

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BCA法について トピック削除
No.9096-TOPIC - 2020/08/22 (土) 13:56:17 - 丹丹
thermoのPierce Micro BCA Protein Assay Kitをつかってタンパク定量したいのですが、Working Reagentとサンプルの比がプロトコルには１：１で書いてあるのですが、先生からは1：20でもできるといわれてずっとやってきました。でも本当にそれで正確に測れるのか？！と不安になってきまして。要はBCA法にはいろんな種類のキットがあってそれぞれにプロトコルがあると思うのですがそれを多少入れ替えて行っても大丈夫なものなのですか？！という質問です。さらに測定範囲の濃度以外でも普通に使ってきたのですが、それも大丈夫なのか心配です。私はまだ研究室に配属されたばかりの大学生です。先生は何十年もやってきた方だと思うので逆らいたくはないのですが、、同じようにやっている方がいらっしゃったら教えてほしいです。大丈夫だよと一言ほしいです笑
　
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No.9096-7 - 2020/08/24 (月) 14:53:07 - dfg
訂正　描き✖ 書き◎

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No.9096-6 - 2020/08/24 (月) 14:52:03 - dfg
偉い人で何十年も間違ったことを正しいと信じて続けてる人も時々います。２人知ってます。

関係ないけど『---描きますかねえ』の「ねえ」はいらないと思う。「ねえ」に込められたものをいろいろ考えてしまい後引くようなやな感じだけが残る。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.9096-5 - 2020/08/24 (月) 10:20:46 - 丹丹
とてもすっきりしました。ありがとうございます。

直線性があれば良いというコメント、先生がおっしゃっていたこととつながりました。といっても本当にうまくいっているのか不安で疑問だらけなので先生にしっかりお話を聞きます。

科学的に論理的に研究できるように頑張ります。

(無題) 削除/引用
No.9096-4 - 2020/08/23 (日) 05:25:09 - おお
その方法で大丈夫かと聞かれたとき、あなたはどう答えるのですか？先輩が言っていたから？BCAでなくてもいいけど、論文を書いてレフェリーからなぜそのような手法をとっているのかと聞かれて、掲示板でOKと言っている人がいたからって書きますかねぇ。

せっかく科学的な実験をしているラボに入ったのだから科学的というのはどういうことかを学んでほしいものです。

(無題) 削除/引用
No.9096-3 - 2020/08/22 (土) 18:18:45 - ちょり
一般論ですが、こういう案件はメーカーのカスタマーサービスに聞いてみるのが一番確実です。メーカーのサイトに問い合わせ先があると思うので。学術の方のそBCA protein assay kitの担当の人が、使用法に関する専門的な内容について答えてくれると思います。販売元ですからその製品については多分世界一詳しいと思うので。BCAは比較的サンプル側の夾雑成分の影響を受けにくい試薬とは思いますが、それもあくまで程度問題なので、１：１ではOKでも、1:20にして許容濃度を越えれば、いろいろよろしくないことが起きてくると思います。

あと、先生に逆らいたくないとか見たいな考え方はしないほうがいいと思います。少しでも疑問あれば筋道立てて、主張の根拠を示しながら納得いくまでお話しすることは研究をしていく上で大切なことと思います。教員としても、あまり考えずに先生の指示通りに動く学生よりも、ずっと頼もしいと思います。それで機嫌悪くなるような先生ならば、残園ですが多分そのくらいの人なのです。

(無題) 削除/引用
No.9096-2 - 2020/08/22 (土) 14:16:43 - め
検量線引いたときに直線性があるなら問題ないと思います．

BCA法について 削除/引用
No.9096-1 - 2020/08/22 (土) 13:56:17 - 丹丹
thermoのPierce Micro BCA Protein Assay Kitをつかってタンパク定量したいのですが、Working Reagentとサンプルの比がプロトコルには１：１で書いてあるのですが、先生からは1：20でもできるといわれてずっとやってきました。でも本当にそれで正確に測れるのか？！と不安になってきまして。要はBCA法にはいろんな種類のキットがあってそれぞれにプロトコルがあると思うのですがそれを多少入れ替えて行っても大丈夫なものなのですか？！という質問です。さらに測定範囲の濃度以外でも普通に使ってきたのですが、それも大丈夫なのか心配です。私はまだ研究室に配属されたばかりの大学生です。先生は何十年もやってきた方だと思うので逆らいたくはないのですが、、同じようにやっている方がいらっしゃったら教えてほしいです。大丈夫だよと一言ほしいです笑
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