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FACSのPI染色を用いた細胞周期解析 トピック削除
No.9094-TOPIC - 2020/08/22 (土) 09:38:21 - axela
FACSのPI染色を用いた細胞周期解析について質問させて下さい。通常二峰性のピークがG0/G1期とG2/M期に出ると思うのですが、FL2A,FL2Hパラメーターで見るとG0/G1期のみにしかピークが見られないのですが、FL2Wパラメーターでは二峰性に見られます。通常FL2Aで評価すべきだと思うのですが、なぜ違いが生じるのでしょうか。細胞はヒト骨髄腫の細胞株で、薬剤刺激等は加えておりません。単核のもの多核のものは混在していると思います。
　
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No.9094-4 - 2020/08/26 (水) 13:17:21 - abc
こんにちは。全然よく分からないのですが、ちなみに PI の Area と FSC の Area を xy 軸にプロットするとどんな感じでしょうか。

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No.9094-3 - 2020/08/23 (日) 20:16:35 - axela
M様
コメントありがとうございます。一応single cell populationを念入りにgatingしましたが結果は同様にFL2Wにのみ二峰性ピークを認めました。
結果は予想外で、普通に増殖している細胞株ですのでG2/M、もしくはpolyploidityによる他のピークが検出されるはずなのですが。。

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No.9094-2 - 2020/08/22 (土) 19:01:23 - M
Cell aggregatesと思います。
ttps://research.missouri.edu/cic/files/Cell%20Cycle%20Basics.pdf

それはそうとして、G0/G1ピークした見られないのは、予想された結果でしょうか？　骨髄腫の細胞株とのことですが、普通に増殖していればG2/Mやポリプロイドの細胞が検出できるような気もしますが、、、

FACSのPI染色を用いた細胞周期解析 削除/引用
No.9094-1 - 2020/08/22 (土) 09:38:21 - axela
FACSのPI染色を用いた細胞周期解析について質問させて下さい。通常二峰性のピークがG0/G1期とG2/M期に出ると思うのですが、FL2A,FL2Hパラメーターで見るとG0/G1期のみにしかピークが見られないのですが、FL2Wパラメーターでは二峰性に見られます。通常FL2Aで評価すべきだと思うのですが、なぜ違いが生じるのでしょうか。細胞はヒト骨髄腫の細胞株で、薬剤刺激等は加えておりません。単核のもの多核のものは混在していると思います。
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