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(無題) 削除/引用 No.9079-8 - 2020/08/18 (火) 21:12:37 - さむ みなさま、様々な意見をありがとうございました。 新しくストックを解凍し、正しい細胞を使えているのかどうかも一度チェックしてみようと思います。

(無題) 削除/引用 No.9079-6 - 2020/08/18 (火) 09:20:28 - はな だめ。 そもそも培養細胞自体、一定回数継代したら性質が変わるため、定期的にストックから解凍して使用した方が良い。ましてや訳のわからない環境に晒してしまった物など即刻捨てるべし。

(無題) 削除/引用 No.9079-5 - 2020/08/18 (火) 00:59:39 - おお >ピーロマイシン耐性細胞ができているかは、わざと一部の細胞を別個に薄くまいて2, 3, 4 ug/mlくらいの濃度で １でセレクトがかかってそれより濃いとすべて死滅するような経験がありますので、、、

(無題) 削除/引用 No.9079-4 - 2020/08/17 (月) 16:23:55 - サクラ 細胞自身があやしいに、一票 私の感覚では、puromycinで1ug/mlはかなり濃いと思います 耐性がないのに、この濃度で死なない細胞って強すぎだと思います

(無題) 削除/引用 No.9079-3 - 2020/08/17 (月) 15:56:54 - み >[Re:1] さむさんは書きました : それとも何らかの耐性細胞が増えてしまったことを考慮し、新しい細胞を使うべきでしょうか。 新しい細胞が用意できるならそうすべきじゃないですか。 安心ですよね。 ピーロマイシン耐性細胞ができているかは、わざと一部の細胞を別個に薄くまいて2, 3, 4 ug/mlくらいの濃度で維持してみたら判明するでしょう。 1ug/mlって株化細胞相手なら最低濃度のような気がする。

(無題) 削除/引用 No.9079-2 - 2020/08/17 (月) 15:10:15 - おお ピューロマイシンは切れが良いので大抵はすぐ死ぬと思います。細胞自身があやしくないかと思ってしまうのは私だけでしょうか。

間違った培地でしばらく培養を続けてしまった場合 削除/引用 No.9079-1 - 2020/08/17 (月) 15:01:05 - さむ 本来使うべき培地にpuromycinを1ug/ml添加した培地で3，4回ほど継代をしてしまいました。細胞にはピューロ耐性遺伝子は組み込まれていません。細胞は死滅せず、通常通り増殖しているように思えます。この場合、適切な培地に戻して培養し続けても大丈夫なのでしょうか？それとも何らかの耐性細胞が増えてしまったことを考慮し、新しい細胞を使うべきでしょうか。 どうかご意見いただけますと幸いです。

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