Bio Technical フォーラム

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GFP発現細胞のソーティング トピック削除
No.9060-TOPIC - 2020/08/05 (水) 12:48:02 - GFP発現学生
今度、GFP安定発現細胞を作るのですが、
GFP発現細胞群を回収する際、
どのようにソーティングされていますでしょうか。
(励起波長等の設定など)

また、ソーティングに関わらず、おすすめの回収方法はありますでしょうか。

ちなみに、GFPと一緒にルシフェラーゼも組み込む予定です。

大変基礎的な質問で申し訳ありません。
 
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(無題) 削除/引用
No.9060-5 - 2020/08/07 (金) 20:19:46 - 聡太ー
ほんと共通機器のFACSぶっ壊す奴がいて困ってる。
もう年間10カ月ぐらいしか稼働できてないんじゃないか。
修理代うん百万で他の共通機器が充実しない。
習熟した人について練習してほしい。

(無題) 削除/引用
No.9060-4 - 2020/08/06 (木) 12:57:22 - オッター
えー?

FACSを普通にやってたら
簡単なことなんですけどね

これがわかんない人なら
ここで解説しても理解できないと思いますけどね

(無題) 削除/引用
No.9060-3 - 2020/08/05 (水) 17:39:01 - 独り言
セルソーターを普段使用していないラボなのであれば、無理してソーターを使うよりも、
1細胞づつに希釈して(限界希釈)して96well plateでクローン化するほうが、なんだかんだ言って簡単。

(無題) 削除/引用
No.9060-2 - 2020/08/05 (水) 13:28:43 - AA
ゲートの条件などは使用する機材にもよりますし、同じ型式でも積んでいるレーザーによって変わったります。
セルソーターは不慣れな人が使うと容易に不調をきたす機械なので、必ず習熟したひとの指導を受けてください。
身近に習熟した人がいないのなら、使用するソーターのメーカーの人に聞いてください。

自分の細胞の条件についてもその人に聞くのが一番で、適当にwebで仕入れた情報で実験することは全くもっておすすめできません。

GFP発現細胞のソーティング 削除/引用
No.9060-1 - 2020/08/05 (水) 12:48:02 - GFP発現学生
今度、GFP安定発現細胞を作るのですが、
GFP発現細胞群を回収する際、
どのようにソーティングされていますでしょうか。
(励起波長等の設定など)

また、ソーティングに関わらず、おすすめの回収方法はありますでしょうか。

ちなみに、GFPと一緒にルシフェラーゼも組み込む予定です。

大変基礎的な質問で申し訳ありません。

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