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(無題) 削除/引用 No.8998-10 - 2020/07/15 (水) 11:45:41 - 自前 これでやってます シーケンス名：マイコプラズマ-F 配列　　　　：YGCCTGVGTAGTMWKYTCGC 合成スケール：0.05μmol 精製方法　　：簡易カラム精製 塩基数　　　：20 mer シーケンス名：マイコプラズマ-R 配列　　　　：GCGGTGTGTACAARMCCCGA 合成スケール：0.05μmol 精製方法　　：簡易カラム精製 塩基数　　　：20 mer

(無題) 削除/引用 No.8998-9 - 2020/07/15 (水) 11:14:03 - まい子 みなさん、色々な情報をありがとうございます。 ぜひとも今後の参考にさせてください。

(無題) 削除/引用 No.8998-8 - 2020/07/11 (土) 00:06:42 - すもも うちはInvivoGenのキットを使っています。 PlasmoTest - Mycoplasma Detection マイコプラズマ陽性の場合はこれを使って、 Plasmocin - Mycoplasma Elimination Reagent もう一度検査して、それでも陽性の場合は破棄しています。

(無題) 削除/引用 No.8998-7 - 2020/07/10 (金) 20:14:14 - 独り言 マイコプラズマはDAPIなどで確かに見えますが、DAPIなどで見られる場合は、かなり増殖した末期の状態です。 なので、感染初期はDAPIでは見えません。 最近なので、ディッシュのなかに数個でもマイコプラズマが存在したら、検出することはできなくても、数週間後には、大量のマイコです。 そのため、目的の細胞を数週間培養後に検出感度が高い方法で見なければなりません。 私が過去の研究所でマイコの試験をするようにいわれて行ったのは、MycoAlertというルミノメーターで発光（マイコ由来のATP)を測定する方法でした。 試薬や機器は必要ですが、培養上清を混ぜるだけなので簡単でした。

(無題) 削除/引用 No.8998-6 - 2020/07/10 (金) 18:26:16 - まい子 どうもありがとうございます。 私も調べたのですが、マイコプラズマはヘキストで染めて簡単に調べられるかなあと思っています。 マイコプラズマもそうですが他の細菌も、PCRで調べることができるそうで、Primerの配列情報も調べたら載っていました。 ルーチンで使ってるPCR酵素で調べられたら楽なのですが。。。 そのような体制で検査しようかなあと考えてます。

(無題) 削除/引用 No.8998-5 - 2020/07/10 (金) 15:44:22 - M 私の所属するラボでは、新規導入する細胞株はマイコプラズマチェックを行うルールになってます。培養液のPCRで、プライマーとプロトコールは昔の論文からです（ネイチャープロトコールか何かだったと思うのですが、昔の人が導入したメソッドなので、はっきり覚えてません）。マニュアルでPCR試薬やプライマーを揃えるより、キットや外注の方が安上がりであれば、その方が良いかもしれませんね。 細菌や真菌のコンタミは培養すればわかるので、特別な事はやっていません。ウイルスのコンタミのチェックもやった事はないです。

(無題) 削除/引用 No.8998-4 - 2020/07/10 (金) 11:21:54 - まい子 早速のご回答をありがとうございます。 教授が調べろとしつこいもので。 確かに受託サービスやkitも販売されてますね このあたりで検討してみます

(無題) 削除/引用 No.8998-3 - 2020/07/09 (木) 18:24:45 - qqq 論文投稿の段で感染がないことを示せとか、細胞を供与するときに汚染がないことを示すということなら、各種メーカーが検出キットを売っているし、委託でやってくれるところもあったはず。

(無題) 削除/引用 No.8998-2 - 2020/07/09 (木) 18:21:37 - qqq マイコ感染であることを確定する必要に迫られたことがないのでしません。 リカバリできるという試薬も売っていますが、本当にリカバリできたのか(除去という意味ではなく)を証明するのは難しいし面倒だし。 ストックを起こし直すか、ストックすら汚染されているなら新たに買った方が禍根を残さない。 学生に無菌操作の教育のためなら意味があるかもしれない。

マイコプラズマの検出について 削除/引用 No.8998-1 - 2020/07/09 (木) 18:06:00 - まい子 みなさんは培養細胞のマイコプラズマの検出を行っているのでしょうか？ もしされているならば、どのような方法で検出しているか教えてほしいです。 また、マイコプラズマ以外の細菌も検出した方がよければ、その細菌名を教えていただきたいです。 宜しくお願いします。

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