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ProteinGで抗体が取れません。 トピック削除
No.8977-TOPIC - 2020/07/02 (木) 14:20:17 - ポンコツ院生
細胞に発現させた抗体をProteinG(Sepharose® 4B fast flow)で精製しているのですが、最近全く抗体が取れなくなってしまいました。

発現確認, pH, buffer組成,流量を再確認し、調整もしてみましたがダメでした。
ProetinGがもうダメになってしまっているのでしょうか?(まだ半年ほどしか使っていません)

どなたかこのようなご経験のある方はいらっしゃいませんでしょうか?
可能であれば、解決策をご教授いただければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.8977-3 - 2020/07/03 (金) 08:12:08 - れんちん
ProetinGビーズは100ulもあれば抗体精製はできますので、一度新しいものに替えてはどうでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.8977-2 - 2020/07/02 (木) 22:43:07 - おお
ProteinGは蛋白なので扱い方によっては変性、バクテリアの繁殖による分解が起こりやすいです。ただし、あなたの場合何が起こっているのかわかりません。

ProteinGで抗体が取れません。 削除/引用
No.8977-1 - 2020/07/02 (木) 14:20:17 - ポンコツ院生
細胞に発現させた抗体をProteinG(Sepharose® 4B fast flow)で精製しているのですが、最近全く抗体が取れなくなってしまいました。

発現確認, pH, buffer組成,流量を再確認し、調整もしてみましたがダメでした。
ProetinGがもうダメになってしまっているのでしょうか?(まだ半年ほどしか使っていません)

どなたかこのようなご経験のある方はいらっしゃいませんでしょうか?
可能であれば、解決策をご教授いただければ幸いです。

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