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(無題) 削除/引用 No.8963-4 - 2020/06/27 (土) 07:46:13 - おお 使った抗体は１種類だけですか？もしそうでないなら全部だめですか？ポジコンは何を使ってますか？同じような抽出で同じぐらいのタンパクがのったものですか？

(無題) 削除/引用 No.8963-3 - 2020/06/27 (土) 07:25:58 - szdfgちj 前に抗体をもらったときに、「融かす際は氷中においてゆっくりとかすように。この抗体は、手とかで急いで融かすと変性してBGが黒くなる」といわれた。

(無題) 削除/引用 No.8963-2 - 2020/06/27 (土) 06:40:48 - 変異導入 前回うまくいった際のサンプルはまだお持ちでしょうか？ もしお持ちなら、それを本試験のSDS-PAGEでも流してみてはいかがでしょうか。 真っ黒になるのは二次抗体が高すぎるか、洗浄が不足しているか、ブロッキングが不十分などが考えられます。もし差し支えなければ、そのあたりの情報を開示されるとコメントがつきやすいかもしれません。 ブロッキングはBSAで行うと私の場合、大抵の場合、真っ黒になります。 スキムミルクでバックが真っ黒になった経験は一度もありません。

上手くいってたウエスタンブロッティングが急にノンスぺ 削除/引用 No.8963-1 - 2020/06/27 (土) 01:04:34 - ハン 上手くいってたウエスタンブロッティングが本試験2回目に急に真っ黒に。TBSTを変更し、バックグラウンドはなくなったもののノンスぺ多数。検索したがわからず、1次抗体（同じロット）2次抗体、ブロッキング剤を新品にするも元に戻らず。ポジコンはきちんと反応。こういった経験された方はいらっしゃいますでしょうか？

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