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(無題) 削除/引用 No.8918-3 - 2020/06/13 (土) 18:48:38 - うに 枠が合うようにBamHIサイトを付加したプライマーでPCRをかけてインサートを調製するのが普通じゃないでしょうか。もちろん他の方法もいろいろあります。 pColdIならHis tagが組み込まれているわけでしょう。His tag融合タンパク質精製の常法でやればいいだけです。 手っ取り早くpColdIに添付のマニュアルや、各社His tag精製システム製品のマニュアル読んだら済む話だと思いますが。

(無題) 削除/引用 No.8918-2 - 2020/06/13 (土) 17:44:36 - おお >[Re:1] ぬーさんは書きました : > cDNAを、pCold�TベクターのBam HIサイトに読み取りわく合わせて組み込む場合、読み取り枠を合わせる方法はなんでしょうか？ 古いやり方などふくめて色々あげようとすると５、６個ぐらいは挙げられると思うので、基本的な方法論を書いた本、ハンドブックなど読んでほしい。一番よく使われるのはPCRでプライマーにタグを入れて合わせる方法じゃないだろうか。 > また、大腸菌に作らせた組み換えタンパク質を、タグを利用して精製するためには、どのような方法で精製すればよいでしょうか？ タグに対してアフィニティーがあるレジン（ビーズ）を使うとしか言いようがないけど、、、まずタグを決めたらそれに対してよく使われるビーズが決められると思うが。

読み取り枠を合わせる 削除/引用 No.8918-1 - 2020/06/13 (土) 16:41:57 - ぬー cDNAを、pCold�TベクターのBam HIサイトに読み取りわく合わせて組み込む場合、読み取り枠を合わせる方法はなんでしょうか？また、大腸菌に作らせた組み換えタンパク質を、タグを利用して精製するためには、どのような方法で精製すればよいでしょうか？

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