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(無題) 削除/引用 No.890-10 - 2012/09/04 (火) 10:17:49 - おお コメントありがとうございました。 >Rh123とかいかがでしょうか これも膜ポテンシャル依存の色素ではなかったでしたっけ。。。 フラクショネーションによるサイトクロムC(ミトコンドリアない)は見てましてこれはクリアーしていると思ってます。サイトゾルはそれに伴った増加は見られていません。何か遺伝子を導入した安定導入細胞株で増殖させるコンディションで見ています。

(無題) 削除/引用 No.890-8 - 2012/09/04 (火) 07:46:07 - カイ Rh123とかいかがでしょうか。 生きたまま固定なしでフローだったと思いますが。 蛋白の透過性になってしまうと、subcellular fractionationでミトコンドリアとサイトゾル、核を分けてウェスタンでAIFとかcytoclomeCを検出ですかね。

(無題) 削除/引用 No.890-7 - 2012/09/04 (火) 06:04:31 - おお あ、そうだもう一つ加えないと行けないのはイオンなどの透過せいというよりはタンパク(サイトクロムCとか)など比較的大きいものを言っています。 最近はカルシウムの透過せいとかいろいろ調べられているようですね。

(無題) 削除/引用 No.890-6 - 2012/09/04 (火) 06:01:06 - おお >[Re:3] おおさんは書きました : > ありがとうございました。 > > polarized=膜透過性増大といっていいのでしょうか。そこがひとつ分からないところです。 de-polarized=膜透過性増大 すいませんうっかりミスをしていましたので訂正しておきます。

(無題) 削除/引用 No.890-5 - 2012/09/04 (火) 05:40:45 - おお コメントありがとうございました。細胞死に関係する(ただ細胞は生きている状態なのでどうもトリッキーなんですが)膜透過性です。膜のポテンシャルを測るのは確かに一般的のような気がしています。示されている色素ではないのですがポテンシャルの低下はしているようです。ただし状況が状況だけにちょっと慎重になっています。 たとえば、呼吸さが何らかの原因であまり機能しなければポテンシャルは下がるわけで、まず膜透過せい減少ありきではないですよね。このあたり突っ込まれる可能性がどの程度あるかと思ったりしています。

(無題) 削除/引用 No.890-4 - 2012/09/03 (月) 11:37:38 - AP 何がミトコンドリア膜を透過する、透過性でしょうか。 膜電位依存的な透過性を持つ物質ならpolarized=膜透過性増大でしょうけれど（Mitotracker、ある種のミトコンドリア移行タンパク質なんかがそうですね。先に挙げられているMitoPTもそのようですが）、非特異的に物質が透過するようなら、そのミトコンドリアは死にかけで膜電位や選択的透過が失われているってことでしょう。 ある物質が、ミトコンドリアに入るかどうかという実験なら、標識（RIとか質量数、場合によっては蛍光物質）物質を与えて、ミトコンドリアを分画し、その中に標識が検出されるかどうかを調べる、ですかね。

(無題) 削除/引用 No.890-3 - 2012/09/03 (月) 10:23:48 - おお ありがとうございました。 polarized=膜透過性増大といっていいのでしょうか。そこがひとつ分からないところです。

(無題) 削除/引用 No.890-2 - 2012/09/03 (月) 10:06:01 - ~ ミトコンドリア透過性移行検出キット MitoPT 説明書きを流し読みする限りでは、細胞培養中の培地に入れて15~20分インキュベートすれば見れるようです。 http://search.cosmobio.co.jp/cosmo_search_p/search_gate2/docs/IMT_/911.20090130.pdf

ミトコンドリア膜透過性を細胞レベルで検出 削除/引用 No.890-1 - 2012/09/03 (月) 09:45:48 - おお ミトコンドリア膜透過性を細胞レベル(すなわち培養している細胞をそのまま観察してとか、染色、固定してかんさつするとか、培養状態でラベルとかして、あと生化学的に検出するとか)で検出する実験系をご存じですか?

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