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HIF1Aのウエスタンブロッティング
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No.8894-TOPIC - 2020/06/07 (日) 15:31:05 - キャノン
細胞を低酸素に置いた後に、HIF1Aのウエスタンブロッティングを行っているのですが、低酸素時のバンドが通常時よりも上にあります。
HIF1Aは分解が速い分子のため、高酸素時は分解産物が、低酸素時はfull lengthのものが出ていると考えているのですが、ご経験のあるかたいらっしゃいますか?
文献を調べた感じでは、バンドが複数になっている論文や企業ホームページはちょこちこあるのですが、その理由が書かれたものはみつからなかったです。
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No.8894-3 - 2020/06/07 (日) 20:58:17 - み
検出しているバンドが特異的なものなのかを調べることもあなたの研究の一部ですよね。
ノックダウンくらいして証明すべきでしょう。
細胞、抗体、細胞処理が違えば見え方も変わってくるでしょうし、抗体データシートや論文も数多くの嘘が含まれる。
(無題)
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No.8894-2 - 2020/06/07 (日) 17:24:34 - おお
>低酸素時のバンドが通常時よりも上にあります。
具体的なサイズは?
HIF1Aのウエスタンブロッティング
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No.8894-1 - 2020/06/07 (日) 15:31:05 - キャノン
細胞を低酸素に置いた後に、HIF1Aのウエスタンブロッティングを行っているのですが、低酸素時のバンドが通常時よりも上にあります。
HIF1Aは分解が速い分子のため、高酸素時は分解産物が、低酸素時はfull lengthのものが出ていると考えているのですが、ご経験のあるかたいらっしゃいますか?
文献を調べた感じでは、バンドが複数になっている論文や企業ホームページはちょこちこあるのですが、その理由が書かれたものはみつからなかったです。
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