Bio Technical フォーラム

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Affimetrix マイクロアレイ トピック削除
No.8875-TOPIC - 2020/05/25 (月) 22:57:52 - ゴリラーマン
Affimetrixの3ダッシュIVTを用いて解析を行いました。
質問は、probe set が3つ同じ遺伝子であるのですが、その内、一つが、BioGPSで情報がありません。このようなprobeは信憑性が薄いため消されたのでしょうか?また、興味がある遺伝子について、real time pcr により発現をきちんと確かめますが、同じ遺伝子の数種類あるプローブのうち差があるものと無いものが混在している場合、それは候補遺伝子から外したほうがいいでしょうか。もちろん、スプライシングバリアントの可能性はあるかと思っていますが。経験上のお話でもよろしいのでコメント頂けたら幸いです。以上です。よろしくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.8875-3 - 2020/05/29 (金) 20:54:56 - ふみ
probeの配列情報を見れたのではなかったかと思います。
その配列をmRNA databaseを対象に検索にかけたら良さそうです。

(無題) 削除/引用
No.8875-2 - 2020/05/28 (木) 20:20:53 - ema
私は外さないで解析を検討します。Affymetrixは短いプローブなので全長を補完する目的で複数プローブを作っていますが、一部どうしても同じ遺伝子名で同じデータにならない事はあります。もとのDATデータ(CELではなく)で確認できるなら観察しても良いと思います。
また、発現量はどのくらいで差が無いと言っていますでしょうか?低い値でのデータ比較では相当ぶれます。
仮の候補として入れて、PCRのプローブの位置を合わせれるなら近いものにして(これを言うのは遺伝子名は同じで違う場所の市販PCRプローブで異なるデータがでて悩む人がいるから)検討するのはいかがでしょうか。

Affimetrix マイクロアレイ 削除/引用
No.8875-1 - 2020/05/25 (月) 22:57:52 - ゴリラーマン
Affimetrixの3ダッシュIVTを用いて解析を行いました。
質問は、probe set が3つ同じ遺伝子であるのですが、その内、一つが、BioGPSで情報がありません。このようなprobeは信憑性が薄いため消されたのでしょうか?また、興味がある遺伝子について、real time pcr により発現をきちんと確かめますが、同じ遺伝子の数種類あるプローブのうち差があるものと無いものが混在している場合、それは候補遺伝子から外したほうがいいでしょうか。もちろん、スプライシングバリアントの可能性はあるかと思っていますが。経験上のお話でもよろしいのでコメント頂けたら幸いです。以上です。よろしくお願い申し上げます。

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