疾患の原因の疑いがある変異がある遺伝子のゲノムのエクソンの3つ上流のイントロンに見つかり、スプライシングの異常を検出したいのですが、患者さんの組織からRNAをとることは現実的に難しい状況で、pcpl3 というexon trapping vectorを用いて人口的にスプライシングを検出しようとしています。このベクターに変異のあった領域をサブクローニングするのに、変異のある箇所を含めゲノムのどこからどこまでを入れればよいのでしょうか?
また、このベクターの内部配列にHIV tat intronという配列があったのですが、これは実験する際に危険なのですか? |
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