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血中タンパク質の分泌臓器の特定方法 トピック削除
No.8770-TOPIC - 2020/04/14 (火) 12:42:18 -
初めて質問させて頂きます。よろしくお願いいたします。


とあるタンパク質Aを分泌する臓器を特定したいです。

病態モデルのマウスで、タンパク質Aの血中量が増加することを発見しました。
しかし、Aは全身に発現しており、どの臓器で分泌されているかが特定出来ていません。臓器特異的ノックアウトを1つずつ行っていくことも考えましたが、時間がかかりそうです。


このような事例で、同じような経験をした方や解決方法が載っている論文、良いアイデアをお持ちの方がいらっしゃいましたら教えて頂けないでしょうか?

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.8770-4 - 2020/04/15 (水) 10:35:16 -
皆さまご返信ありがとうございます。

現在mRNAを解析中ですが、発現量ではなく分泌が変化しているような傾向が出ています。皆様のアドバイスをもとに、臓器ごとのタンパク量の解析を進めて行こうと思います。


貴重なご意見ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.8770-3 - 2020/04/14 (火) 16:45:43 - 1234567
主要臓器・組織の発現レベルを正常マウスと病態マウスで比較してみて病態マウスで有意に高い組織を特定することはまずできることと思います。必要ならIn situなどでより細かくみていくこともできると思います。もちろんAの血中濃度の増加がmRNAの発現レベルだけで決まるわけではないですが、一つの手がかりとしてではありますが、重要な知見は得られると思います。免疫組織染色も並行してやってみることも重要と思います。分泌タンパク質なので細胞内にはあまりないかもしれませんが一応。血液は必ずしも還流で除去しなくてもいいかもしれません。組織に残る血液中のAの量の組織間での差異が免疫染色で反映されればそれはかって重要な手がかりになるかもしれないので。

(無題) 削除/引用
No.8770-2 - 2020/04/14 (火) 13:34:31 - tts
ノックアウトの作成を検討したということは、目的のタンパク質Aに対する遺伝子Aを特定できていると言うことでしょうか。
であるなら、遺伝子AのmRNA量が疾患に伴い増加するという前提ですが、ノーマルと病態モデルの各臓器を回収してmRNA量の違いから解析するのが楽では。

その他の方法なら、抗タンパク質A抗体があるなら、同じく臓器から粗精製回収したタンパク質Aを検出できるELISA系でも構築して、評価するのが手っ取り早い様に思います。

血中タンパク質の分泌臓器の特定方法 削除/引用
No.8770-1 - 2020/04/14 (火) 12:42:18 -
初めて質問させて頂きます。よろしくお願いいたします。


とあるタンパク質Aを分泌する臓器を特定したいです。

病態モデルのマウスで、タンパク質Aの血中量が増加することを発見しました。
しかし、Aは全身に発現しており、どの臓器で分泌されているかが特定出来ていません。臓器特異的ノックアウトを1つずつ行っていくことも考えましたが、時間がかかりそうです。


このような事例で、同じような経験をした方や解決方法が載っている論文、良いアイデアをお持ちの方がいらっしゃいましたら教えて頂けないでしょうか?

よろしくお願いします。

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