Bio Technical フォーラム

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ELISAのnegative contの吸光度が小さすぎる件で トピック削除
No.8758-TOPIC - 2020/04/08 (水) 16:36:30 - d fgvbhjuik
最近見出したある抗体の活性をみるELISAでネガティブコントロールのwell(この抗体とは反応しないと考えられるタンパク質をコートしている)の吸光度からバックグラウンドのwell(何もコートしていない)の吸光度を引いたら-0.01くらいになりました。同じネガティブコントロールは5wellあり平均を出したのですが-0.01は0とみなして計算していいのでしょうか、それとも−0.01で計算すべきでしょうか。というか値がマイナスになるのはおかしいのでこの実験のデータはすべて使えないと言われたのですが。negative controlはほとんど何も反応しないので値が小さすぎて変動しやすいのです。
 
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(無題) 削除/引用
No.8758-3 - 2020/04/09 (木) 04:01:27 - tomo
0.01ならゼロでいいでしょう。

(無題) 削除/引用
No.8758-2 - 2020/04/09 (木) 00:15:32 - おお
直線の検量線を引くならBlankの値を引かなくてもできます。

>値がマイナスになるのはおかしいのでこの実験のデータはすべて使えない

根拠が知りたいです。

ELISAのnegative contの吸光度が小さすぎる件で 削除/引用
No.8758-1 - 2020/04/08 (水) 16:36:30 - d fgvbhjuik
最近見出したある抗体の活性をみるELISAでネガティブコントロールのwell(この抗体とは反応しないと考えられるタンパク質をコートしている)の吸光度からバックグラウンドのwell(何もコートしていない)の吸光度を引いたら-0.01くらいになりました。同じネガティブコントロールは5wellあり平均を出したのですが-0.01は0とみなして計算していいのでしょうか、それとも−0.01で計算すべきでしょうか。というか値がマイナスになるのはおかしいのでこの実験のデータはすべて使えないと言われたのですが。negative controlはほとんど何も反応しないので値が小さすぎて変動しやすいのです。

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