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(無題) 削除/引用 No.8649-12 - 2020/02/18 (火) 14:52:13 - カートン箱 私もメーカー間でタンパク生産に差が出るのは経験があります。 麹菌発現系と酵母発現系で、DifcoのBacto Yeast Extractで上手く生産できていたのが、他社の酵母エキスでは数分の１に組換えタンパク生産量が落ちてしまいガックリしました。 系統立てて検証したわけではありませんが、原因を切り分けると酵母エキスを変えたところに行きついたので、それが原因だと思っています。 この手の天然由来成分は、メーカー間で作り方が同じでも原料の種類や配合が違っていて、結果的に成分が全然違う場合があるそうです。 例えば ・ペプトン→100%カゼイン、カゼイン＋大豆タンパク混合（メーカーごとに混合比異なる） ・酵母エキス→専用に培養した酵母、発酵生産の副産物として得られた澱、S. cerevisiaeでない種の酵母 ・potato dextrose broth→ジャガイモの産地によってミネラルと金属の含有量・比率が違う あたりは結構有名な話かと。

(無題) 削除/引用 No.8649-11 - 2020/02/18 (火) 07:57:54 - おお レスありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.8649-10 - 2020/02/17 (月) 11:52:11 - Pumpkin >AP様 おお様 さく様のお話の通り、タンパク発現です。 流石にまったく発現しないというのは 見たことないのですが、 トラブルシューティングしていくなかで、 トリプトンという原因に行き着きました。

(無題) 削除/引用 No.8649-9 - 2020/02/17 (月) 11:19:59 - さく ばらつくと胸を張って言えるほど頑張ってデータは取っていないのですが、私も大腸菌のタンパク質発現系でDifcoと他社品で発現量に結構な差が出たことがあります。他社品でも発現はするけど量がDifco品に比べるとだいぶ少なかったです。色々検討するのは面倒なので、それ以来発現の時は愛用しています。今は発現をやってないので影響はないのですが、早く安定供給してくれることを願うばかりです。

(無題) 削除/引用 No.8649-8 - 2020/02/15 (土) 04:12:43 - おお >後学のために、どういった実験でばらついたり再現性が得られなかったりするんでしょう？ I'm interested in it, too.

(無題) 削除/引用 No.8649-7 - 2020/02/14 (金) 14:52:47 - AP 後学のために、どういった実験でばらついたり再現性が得られなかったりするんでしょう？ タンパク質発現系とか？

(無題) 削除/引用 No.8649-6 - 2020/02/14 (金) 10:49:12 - Pumpkin 使用用途によってなのでしょうが、 他社製品だと実験がばらついたり、 再現性が得られないことがあります。 天然物由来なのでロット間差もあるわけですが、 販売会社としては供給責任をもってもらいたい、 と思いつつ、他社製品で再現できない原因を 追求していく必要性はこちらにあるわけで。 自然界のボタニカルで薬効が認められても、 栽培すると確認できないなんてことも ざらですから、割り切るしかないかもですね。

(無題) 削除/引用 No.8649-5 - 2020/02/14 (金) 10:05:43 - AP もはや記憶も曖昧だけれど、DifcoはGibcoに吸収されて、GibcoがBRLと合併したり、Lifetechという会社になったり、Invitrogenに吸収されたり。 直近じゃDifcoはBD社の傘下だったのが、今やみんなまとめてThermo社の傘下になっているようです。 LBだってyeast extranctだけじゃなくtryptoneも成分ですよね。 LBは調製済みを購入されているのかしら。うちじゃ、自前で調整するのでtryptoneはかなり消費します。

(無題) 削除/引用 No.8649-4 - 2020/02/14 (金) 08:27:21 - おお DifcoっていまGibcoブランドなんだっけ?。たしかにこちらからオンラインで見る限り在庫ぎれだね。MilliporeSigmaの tryptoneなら在庫があるように見える。

(無題) 削除/引用 No.8649-3 - 2020/02/13 (木) 23:43:38 - 自分のストックは確保したい LBやYeastなら需要もあるからそれほどじゃないにしろ tryptoneとかだとLB程じゃないので 発注してもそこそこ時間かかるようなイメージ。特にDifcoとか。 夏に発注したら秋に来たことがあって 欠品のせいと言われたらそうかもしれないけど 海外のものだと遅れる可能性も見越して余裕持って発注かけるのが無難。

(無題) 削除/引用 No.8649-2 - 2020/02/13 (木) 19:33:38 - AP そうなんですか？ 国内代理店が和光純薬（現、富士フィルム和光純薬）じゃなくなって、 Difco自体も吸収合併で流浪して親会社を渡り歩き、 しばらく前から、なんかすごい買いにくくなったんだよな。値段高めだし。 だから今は、国内メーカー（半井）の別製品にしている。 組換え実験用の大腸菌くらいだったら、培地のブランドなんて関係ないし。

Bacto tryptone 削除/引用 No.8649-1 - 2020/02/13 (木) 17:04:53 - Pumpkin 世界的な欠品が起きているようですが、 皆様のところ、影響はいかがでしょうか。

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