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(無題) 削除/引用 No.864-3 - 2012/08/24 (金) 22:45:01 - M miRNAの検出は、よくやっておりますが、Looped-RT PCRを用いRealtime PCRで検出を行なっております。 カラム精製ですが、私は、QIAGENのカラムを使っております。

(無題) 削除/引用 No.864-2 - 2012/08/24 (金) 18:01:05 - g RNA exosome knockdownして検出 oligoでtarget RNAをキャプチャー&濃縮して検出 divergent transcription in Scienceの幾つかの論文を見なさい。

２０塩基ほどRNAの検出 削除/引用 No.864-1 - 2012/08/24 (金) 17:56:45 - おばん 最近、分化などに関わる遺伝子では、その転写開始点から ２０塩基ほどRNA合成が進んだところでRNA polymerase II が停止している(pol-II pausing)という現象が有るらしい です。そこで質問なのですが、このように短い（２０塩基 ほど）のRNAを培養細胞から抽出して検出することは可能で しょうか？ そんな試みをされた人はおそらく少なく、また私もRT-PCR がやっと出来るくらいの素人なのでよく分かりませんが、 多分、エタ沈の高率は大変悪いと思われます。またRT-PCR のプライマーを設定するのも難しく、ノーザンでメンブレ ンにトランスファーするのも難しそうです。幾つかの会社、 例えばmirVanaという名前のmiRNAの抽出、検出キットがLife technologiesという会社から出ています。またmicroRNA Extractor(Wako)やNucleoSpin(Takara)、というのもあるよ うです。もし、使用された経験(miRNAの検出という用途で もかまいません）のある方がおられましたら、使い勝手や ご意見などお聞かせ願えますと幸甚です

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