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(無題) 削除/引用 No.8625-3 - 2020/02/05 (水) 14:40:32 - qq ＞放射標識したADPを分離しようと考えている 何から32P-ADPを分離しようと考えているのでしょうか？ 32P-正リン酸でしょうか、32P-ATPでしょうか？ 135mMグリセリンで溶出するのは何か不思議な感じですが、そのような方法があるのかもしれません。 ＞本来であれば、ADPがカラムに吸着するため、素通り画分で放射線量は ＞測定されないはずなのですが、結果には放射線が確認されています。 最初に戻りますが、何から何を分離したいのかということです。素通り画分で測定されるカウントは、ADPにする前のRIではありませんか？ 32P-ADPができていない可能性も考えておく。 Q-sepharoseで分離すると、pH8で0-0.3M NaCL濃度でAMP/ADP/ATPの順番に溶出されます。

(無題) 削除/引用 No.8625-2 - 2020/02/05 (水) 14:14:27 - おお のせた放射活性に比べどの程度ですか？ 素通り画分といいますが、どの様にして素通りと判断しましたか？ 135 mMのグリセリン水溶液に置換後カラムから出てくる溶液のｐHはどれくらいですか？

陰イオン交換樹脂を用いたADPの分離 削除/引用 No.8625-1 - 2020/02/05 (水) 13:58:52 - おお 陰イオン交換樹脂AG1-X8を用いて放射標識したADPを分離しようと考えているのですが、分離が上手くいかず難航しています。 プロトコールは、 膨潤させたAG1-X8を注射筒に詰め、1規定のNaOHを20倍量加え 樹脂をOH型に変更させたのちに、135 mMのグリセリン水溶液を3倍量加えています。その後、放射性標識したADP含有サンプルをアプライした後に135 mMグリセリンをアプライし、素通り画分の放射線量を測定しています。 本来であれば、ADPがカラムに吸着するため、素通り画分で放射線量は測定されないはずなのですが、結果には放射線が確認されています。 思い当たることがある方等いらっしゃいましたら、 アドバイスをお願いします

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