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(無題) 削除/引用 No.8620-10 - 2020/02/04 (火) 18:49:29 - エタ沈 皆様 色々アドバイス頂きありがとうございます。 諸事情あり、なかなか聞ける人がおらずこちらでお伺いさせていただいたのですが、なんとかリカバリー出来そうな感じがしてきましたので、本当に感謝しています。 こんな超初心者質問に親切にコメント頂きましてありがとうございました！

(無題) 削除/引用 No.8620-9 - 2020/02/04 (火) 16:05:08 - 774 方法論は皆さんが提案していらっしゃるから良いとして、 > 実験初心者で、何をどうしたら良いかわからず、焦っています。 趣味でやってるならここで聞くのも良いけど、そうでなければまず指導者に聞くべきじゃないかね…。失敗の報告という意味でも。

(無題) 削除/引用 No.8620-8 - 2020/02/04 (火) 13:52:56 - おお ＞70% EtOHでリンスしていないようだから塩を加えずEtOHだけでも大丈夫かもね。 現実そうか分からないけど、溶けてしまったとおっしゃってる。それなら塩が必要な気がしますが・

(無題) 削除/引用 No.8620-7 - 2020/02/04 (火) 13:33:43 - み 70% EtOHでリンスしていないようだから塩を加えずEtOHだけでも大丈夫かもね。 まあ30% EtOH状態での冷凍保存で分解はされないと思う。

(無題) 削除/引用 No.8620-6 - 2020/02/04 (火) 12:41:32 - bluehornet 大丈夫かどうかはなんとも言えないと思いますが、僕だったら、「み」さんがおっしゃるように塩や共沈剤を入れて混合した後、エタノールを加えよくボルテックスした状態まで持っていってから-20℃なり-80℃なりで保存します。 遠心は後日で大丈夫かと・・・。

(無題) 削除/引用 No.8620-5 - 2020/02/04 (火) 12:34:05 - エタ沈 み様 コメントありがとうございます！ 塩として使えそうな試薬を探して、エタノールを入れて遠心してみます！ 今日いますぐ実験できない場合、３０％エタノールの状態で−２０度とか−８０度で保存するのはOKでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.8620-4 - 2020/02/04 (火) 12:30:24 - み 酢酸ナトリウムとかで塩濃度上げて、final70-80%になるようにエタノール添加して遠心したら再沈殿するんじゃないの

(無題) 削除/引用 No.8620-3 - 2020/02/04 (火) 12:29:29 - エタ沈 おおさま すみません、慌て過ぎていて細かい点を書いていませんでした。 Trizolで組織からRNAを抽出して、最後イソプロパノールと混ぜて遠心後、エタノールでwashしようとしたら、間違えて７０％ではなく３０％エタノールを入れてしまい、ペレットが溶けて全く見えなくなってしまったのです。少し１００％エタノールを入れても変化なかったので、エタ沈をした方がよいのかなと思っているのですが、実験経験が少なく、こういう時どうしたらよいのか、どなたかアドバイスいただけないかと思った次第です。非常に低レベルな話ですみません。

(無題) 削除/引用 No.8620-2 - 2020/02/04 (火) 12:17:00 - おお 状況がよく分かりません。どういう方法で精製しようとして、どの段階の話か書くべきではないですか？ その上で、その文面だけならさらにエタノールを加えて最終のエタノール濃度が同じようにすればと思えるのですが、そういう単純な発想を思いつかないと思えないので、何かこの方法論に問題があると考えているのですか？

RNAを３０％エタノールで溶解していしまいました！ 削除/引用 No.8620-1 - 2020/02/04 (火) 12:08:41 - エタ沈 基本的な質問ですみません！ RNA抽出で、最後に間違えて70%エタノールではなく30%エタノールで溶解してしまい、RNAが溶解してしまいました・・・ ここからRNAを抽出するには、どうしたら良いでしょうか（１日くらい、３０％エタノールに入れたまま冷凍保存可能ですか）？ 実験初心者で、何をどうしたら良いかわからず、焦っています。 どなたかお助け頂ければ幸いです。

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