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RNase阻害剤
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No.858-TOPIC - 2012/08/23 (木) 13:53:44 - KM
いつも勉強させて頂いております。
T7 RNA polymeraseを用いたin vitroでの転写実験を計画しています。RNA合成時にはRNase阻害剤を添加すると思いますが、RNasinなどのタンパク質性の阻害剤は高価ですので、もし安価なRNase阻害剤があれば紹介して頂ければ大変助かります。宜しくお願い致します。
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ありがとうございます
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No.858-6 - 2012/08/29 (水) 09:40:42 - KM
お礼が遅くなりました。申し訳ありません。
in situさん、おおさん、ご回答ありがとうございます。また貴重な時間を使って調べて下さり感謝致します。確かに開き直ればRNasinは必要ないかもしれません!できる限りクリーンな(?)材料と環境を意識すれば実験できないわけではないので、その線でも頑張ってみます。今からまた書き込んで下さった会社等を探して、良いものがあれば投稿させて頂きます。
(無題)
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No.858-5 - 2012/08/26 (日) 06:02:50 - おお
そうだ、日本ジーンさんとか割安なやつ売ってないんでしょうかねぇ。NEBさんとか、ファーメンタスとか、、、
(無題)
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No.858-4 - 2012/08/26 (日) 05:25:30 - おお
あ、開き直ればRNasinは必須ではないですよね。
(無題)
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No.858-3 - 2012/08/26 (日) 05:24:09 - おお
わたしも違う理由でいろいろ調べたりしてみましたが、一つはどの程度ブロックできるかという点で結論がでないのと、核酸アナログとか、ポリメラーぜとかにも新和性があったりして、阻害が起こるようなものもあって使えるかどうかも分からないものばかりでした。まあ特殊な試薬はケミカルであっても高いことはありますから(特定せずにいうのはなんですが)どんなもんでしょう。。。
(無題)
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No.858-2 - 2012/08/23 (木) 13:59:59 - in situ
ちょっと直接の回答でなくて申し訳ありませんが。
プロメガのT7の合成キットにはT7 RNA polymeraseとともにRNAse inhibitorも含まれていたと思います。
DIGとかでラべリングするのが目的ならばRocheからラベルNTPだけ購入して、プロメガの合成キットを使えば安くなると思います。
RNase阻害剤
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No.858-1 - 2012/08/23 (木) 13:53:44 - KM
いつも勉強させて頂いております。
T7 RNA polymeraseを用いたin vitroでの転写実験を計画しています。RNA合成時にはRNase阻害剤を添加すると思いますが、RNasinなどのタンパク質性の阻害剤は高価ですので、もし安価なRNase阻害剤があれば紹介して頂ければ大変助かります。宜しくお願い致します。
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