全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.856-5 - 2012/11/01 (木) 17:45:39 - 組織 他の方も書かれてますが、固定液の種類、スクロース濃度、クリオスタット薄切時の温度などの情報があると、具体的なアドバイスがもらえるかもしれません。以下、気づいた点です。 スクロース置換で組織は沈んでますか？ 薄切時に組織がすだれ状になる時は、クリオスタット庫内の温度が低すぎることが多いです。 電顕用とのことですが、固定液にグルタールアルデヒドは入ってませんか？ グルタールで固定すると組織が固くなります。

(無題) 削除/引用 No.856-4 - 2012/11/01 (木) 15:49:15 - とおりすがり 今日、その道２０年のテクニシャンに立ち話で伺ったところによると、 スクロースの濃度も砕けちゃうかどうかに関係するようです。 相当古いトピックなので、もう、ご覧になっていないだろうな、と思いますが。他には、お試し済みかもしれませんが、厚さ、温度も、砕けるかどうかにかかわるそうです。

追加 削除/引用 No.856-3 - 2012/08/24 (金) 00:52:53 - ちょりーす ちょりーすさん＞ 書き込みありがとうございます。 私は、ICRマウス8週齢を用いてます。 電顕（TEM）にて観察したいため、いまでより強い固定を行っています。 還流固定後、脳を骨よりとりだし、2mmほどにナイフにて切り、浸漬固定、スクロース置換しています。 また、クリオスタットできろうとしたとき ・かき氷のようにパサパサ散る ・組織が抜ける ・組織が途中で切れる という状態です。 アドバイスのほうよろしくお願いいたします。

固定を変更したらうまくいかなくなったのですよね？ 削除/引用 No.856-2 - 2012/08/23 (木) 10:40:39 - ~ >最近、還流固定をしっかり行うようになって、うまく切片がきれなくなりました。 今まではうまくできていて、これ以外の変更点がないのでしたら、 いままで通りに還流固定を甘めにするのがいいのでは？ 他の部分を試行錯誤する必要はあるのでしょうか？ うまく切れないとはどのような状態になっていることを意味しているのでしょうか？ その状態によっては、原因を推測できる場合があるでしょう。 固定やスクロール置換が甘いのが原因であれば、還流固定後に不要部分を切り取ってトリミングし、目的部分の固定・スクロース置換が効率よく行われるようにしてはいかがでしょうか。 なにの脳かが書かれていませんが、半日x2ではスクロース置換が甘いような気もします。 今は夏で室温が高いために、これまでと温度条件が変わった可能性はありませんか？ （切るところまではうまくいっているが、スライドガラスに貼り付ける前に溶けて破れやすくなり、破ってしまう等） また、ブレードが痛んでうまく切れないということはありませんか？ ブレードは消耗品です。

脳　固定 削除/引用 No.856-1 - 2012/08/23 (木) 09:05:08 - ちょりーす 還流固定を行い、浸漬固定1日×2、スクロース置換半日×2を行い凍結ブロック作成後、クリオスタットにて切片作りを行ているのですが、最近、還流固定をしっかり行うようになって、うまく切片がきれなくなりました。 温度を変えたりと施行錯誤しているのですが、うまくいきません。 なにか直すべきところがありましたら教えてください。

全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---