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(無題) 削除/引用 No.8554-2 - 2020/01/12 (日) 12:17:59 - ちき https://www.biolegend.com/en-us/products/zombie-green-fixable-viability-kit-9340 Can I use Zombie with cells suspension containing serum? Serum is full of proteins which will sequester the dye and thereby reducing its effective concentration. The basic rule of thumb with zombie is to titrate it based on your specific condition. Titration also helps reduce the background and spillover into other channels. 細胞の生存率と染まり具合を勘案して自分でtitrationすればいいだけの話。想像もつくし、メーカーのページに書いてある。

Zombie Green 削除/引用 No.8554-1 - 2020/01/12 (日) 11:25:07 - Zombie Green 質問をさせていただきます。 Zombie Greenを使って死細胞を解析から除外したいのですが、Zombie Greenの添付文書を見ると、protein freeのPBSに懸濁した細胞を、Zombie Greenで室温10-15分反応させ、その後、PBSで一度洗浄するように書かれてあります。 これに関して質問したいのですが、 細胞の生存率を高めるため、血清非存在下で室温10分も細胞を晒すことができません、そこで私の方で５％FBSを含むPBS中で氷上15分反応させ、その後5％FBSを含むPBSで洗浄してみたところ、きちんと細胞が染まりました。 そこでこれで行きたいのですが、何かその後に不都合なことって起こりえますか？ なぜ添付文書にはprotein freeのバッファーが推奨され、室温反応が推奨されていたのでしょうか？ みなさまの中で、FBSやBSAを含むPBSに懸濁した細胞を氷上で染められたことはありますでしょうか？ ご意見を聞かせていただけると幸いです。

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