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(無題) 削除/引用 No.8548-6 - 2022/02/24 (木) 13:59:53 - toto こういう中身不明の抽出液でも問題ないときもありますが、論文投稿したときにreviewerからどのような化合物で抽出したのかを求められることが割とあります。そのため、実験をやりなおしになることもあります。組成が明記された溶液をつかうのが無難でしょう。なお、その書かれてる組成では膜蛋白はほぼ可溶化されません。

(無題) 削除/引用 No.8548-5 - 2022/02/24 (木) 13:10:58 - nmkl 細胞質と核を分けてタンパク質撮りたいのが目的なら、論文探せばそういう実験は昔からいくらでもあると思いますので、それ見て自分の実験の内容と照らし合わせて、適切なものを選んで自分で作れば良いのでは。要はMgCl2が入ってて、非イオン性の界面活性剤が低濃度入ってれば、おおかたどれでも同じと思います。

(無題) 削除/引用 No.8548-4 - 2022/02/24 (木) 11:42:23 - 通りすがり 2000 年の論文で M-PER を MALDI MS で組成を分析しています。 Analytical Biochemistry 285, 205–210 (2000)​ doi:10.1006/abio.2000.4734​ M-PER の界面活性剤は CHAPS です。 バッファーは Bicine、リン酸 H2PO4- を含む組成のようです。 他に B-PER と Y-PER も分析しています。

(無題) 削除/引用 No.8548-3 - 2020/01/10 (金) 23:52:44 - １２あsw３絵d４rf５tg６yh７う だわな。

(無題) 削除/引用 No.8548-2 - 2020/01/08 (水) 23:24:06 - おお ”それで良いのでしょうか” っていう質問は違和感があって、あんたの実験とかしらんがな、って答えたくなりますが、、、組成見る限りだいたいそんなもんかなと思えます。何よりも大事なのはその条件であなたのターゲットの蛋白が下流の実験に使えるように抽出できるかで、それは少し条件を検討したり、同様の蛋白が他の研究グループでどのように抽出されているか調べて判断するのが通常のやり方ではないでしょうか。 そんなことはないでしょうけど。何時でも先生がいて、正解です、間違えです的な答えを教えてくれるものと思っているなら少しそこから脱却できるようにしてみるといいかなと思います。

M-PER buffer (Thermo Fisher)の組成 削除/引用 No.8548-1 - 2020/01/08 (水) 18:13:28 - 生物活性分子 哺乳動物細胞から、細胞質のタンパク質を抽出する緩衝溶液(バッファー)として市販されている、M-PER buffer (Thermo Fisher)の組成を知っている方がいたら教えてもらえないでしょうか？ 論文を数件読んでも、Googleで調べても、単にM-PER bufferとしか書いていないので、自作できなくて困っています。購入すると高くつくので、出来れば自作したいです。 Thermo Scientific™　製品番号: 78501 M-PER™ Mammalian Protein Extraction Reagent 250 mL　60,500 円 自分が組成を推測するに、似たような市販品もので、 細胞溶解バッファーM 製造元 : 富士フイルム和光純薬(株) と同じなのではないかと思っていますが、本当にそうなのか疑問です。 組成：20mM Tris-HCl, pH7.4, 200mM NaCl, 2.5mM MgCl2, 0.05w/v% NP-40 この組成（和光のバッファー）なら、現在研究室にあるのもですぐに作成できるのですが、それで良いのでしょうか。

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