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(無題) 削除/引用 No.8477-4 - 2019/12/10 (火) 04:25:55 - おお ポッカリ抜けてというのが腑に落ちないですが、たとえばDAPIなどで細胞の存在は確認できるのでしょうか？ 抗原賦活化にTrypsinなどを使うことがありますが、うまく行けばそれで浸透させることができるかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.8477-3 - 2019/12/08 (日) 18:14:19 - クァsウェDrftgy不二子lp； 壊死してしまって構造が維持できていない（融解みたいな感じ）のではないでしょうか。大きな固形腫瘍の中心部などではそういうことはあると思います。

(無題) 削除/引用 No.8477-2 - 2019/12/08 (日) 12:57:13 - toto 抗体というより溶液が浸透してないような気がします。もしかすると、固定液の中にエタノールを20%程度入れて固定すると、溶液がしみこみやすくなって、一旦そうなると、後の免疫染色での浸透性がよくなるかもしれません。

抗体の浸透度を上げたい 削除/引用 No.8477-1 - 2019/12/07 (土) 13:26:41 - Bz ゼブラフィッシュを用いてがんの解析を行っています。 おそらく疾患特有の細胞・組織病変によるものだと思いますが、病変内部の免疫染色像がポッカリ抜けてしまいます。現在、固定後の wash や免疫染色等は PBS+0.4% TritonX100 で行っています。浸透度を上げるには Triton を最大どのくらいまで上げられるか、また、別に加えると良い試薬があれば教えてください。 サンプルは大体100μm立法の組織を whole mount で免染しています。がん細胞がない領域はきれいに染色できます。 切片を切る方法もあるかと思いますが、免疫染色で抗体の浸透度を上げる手段についてご助言いただけると幸いです。

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