Bio Technical フォーラム

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Cre トピック削除
No.8476-TOPIC - 2019/12/07 (土) 01:12:34 - うっちー
Cre/loxPシステムを用いたコンディショナルKOマウスの表現型解析を行っています。
骨格成長に関与する遺伝子のCreマウスを購入し、目的遺伝子の骨格成長における役割について解析を行う予定です。しかしながら、購入したCreマウス自体が、野生型マウスと比べて成長発育が遅い(体格が小さい)ように感じます。このようなことはあるのでしょうか。この場合、Creマウス自体に問題があると考えるべきでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.8476-3 - 2019/12/07 (土) 22:07:20 - M
「骨格成長に関与する遺伝子のCreマウス」というのは、その遺伝子座にCreがノックインされているマウスでしょうか? あるいはその遺伝子のプロモーターにCreを繋いだコンストラクトのトランスジェニックでしょうか? 前者であればCreノックインにより「骨格成長に関与する遺伝子」がヘテロになるので、骨格成長に影響する可能性もあるでしょう。

後者の場合は、成長発育に明らかな影響の無いラインが、樹立時に選択されているのではないかと思います。そのCreマウスを一回野生型と交配して、同性でCreを持たないリッターメイトと成長発育を直接比較して見ると良いと思います。培養細胞ではCreの活性化により非特異的にゲノムダメージが引き起こされる事が報告されているので、マウス体内で「骨格成長に関与する遺伝子」を発現する細胞に、そのようなゲノムダメージがCreにより引き起こされれば、骨格成長に何らかの影響が出るかもしれません。ただし、私個人の経験では、汎用されているCreマウスでそのような表現型(Creによるゲノムダメージに起因すると思われる表現型)を見た事はないですけどね。

(無題) 削除/引用
No.8476-2 - 2019/12/07 (土) 03:14:01 - 璃子
体格が小さいならその可能性は極めて高いと思います。ありえます。
そう言う場合のコントロールはf/w, Cre+か、w/w, Cre+を用いればいいと思います。

差し支えなければCreラインを示されるといいかと思います。

Cre 削除/引用
No.8476-1 - 2019/12/07 (土) 01:12:34 - うっちー
Cre/loxPシステムを用いたコンディショナルKOマウスの表現型解析を行っています。
骨格成長に関与する遺伝子のCreマウスを購入し、目的遺伝子の骨格成長における役割について解析を行う予定です。しかしながら、購入したCreマウス自体が、野生型マウスと比べて成長発育が遅い(体格が小さい)ように感じます。このようなことはあるのでしょうか。この場合、Creマウス自体に問題があると考えるべきでしょうか。

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