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(無題) 削除/引用 No.840-4 - 2012/08/19 (日) 10:42:08 - 中年 もう一方のトピックにも書きましたが、DNA断端がrecombinogenicなので、ORF内で切断するほうが効率が高いでしょう。 環状のプラスミドでORFの中央付近で組換えが起こりやすくなる理由はないでしょう。マーカー遺伝子が宿主由来のもの（酵母ならURA3やLEU2のような）であれば、そちらで組換えが起こることも同様に起こります。

酵母と細菌です 削除/引用 No.840-3 - 2012/08/17 (金) 22:53:01 - 初心者 中年様、ありがとうございます。生物種を記載していませんでした。宜しくお願いします。

(無題) 削除/引用 No.840-2 - 2012/08/15 (水) 23:09:04 - 中年 どの生物種の話でしょうか？

相同組換えで遺伝子破壊2（シングルクロスオーバーの場合） 削除/引用 No.840-1 - 2012/08/15 (水) 22:37:27 - 初心者 先に、ダブルクロスオーバー組換えのことも質問させて頂きました。長くなりますので、新たに投稿いしました。よろしくお願いします。 シングルクロスオーバー組換えで遺伝子ノックアウトを行う場合、 選択マーカーや標的遺伝子ORFを組み込んだプラスミドは、リニアにするのと環状のままでは、どちらが良いのでしょうか。 どちらでも構わないし、環状で使用した場合は、ORFのちょうど半分くらいの位置前後で、プラスミドに組み込んだORF⇔宿主のORF組換えが起こるとも言われました。 組換えの起こる位置は　大抵どんな宿主でもORF中間部（たとえば1KbのORFなら500ｂｐ付近）と決まっているのでしょうか？そのあたりのメカニズムを勉強中ですが、いまいち核心に触れられません。

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