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(無題) 削除/引用 No.8380-4 - 2019/11/09 (土) 03:22:16 - おお プラスミドを取るときは定常期あたりまで引っ張ります。これはそちらのほうがRNA量が少ないというメリットがあるからだそうです。ということは蛋白発現量は下がるってことですよね。また、死菌も増えてくるだろうし、抗生物質によっては分解が進んでプラスミドが維持されなくなってくる場合もあるかと。

(無題) 削除/引用 No.8380-3 - 2019/11/07 (木) 17:22:35 - moz 最近はIPTGよりOD測定が不要なAutoInduction Mediumを使うことが多いです。

(無題) 削除/引用 No.8380-2 - 2019/11/07 (木) 17:21:11 - moz 定常期になるとリボソームの不活性化がおきます。 培地にも寄りますが、「目的タンパクの合成用に栄養が豊富」x「菌体数が多い」時期だと思われます。 基本的には過去の数多くの（研究者・タンパクの種類など）経験から失敗が少なく収量が（それなりに）多い条件です。収量Maxを目指すならその辺りのODで数点試してみるべきです。

大腸菌のタンパク質異種発現について 削除/引用 No.8380-1 - 2019/11/07 (木) 13:44:16 - tk 　大腸菌で異種発現を行っているときにふと思ったのですが、発現誘導（IPTGだったり低温だったり）のタイミングってどの論文でも大体OD600が0.4〜0.8の時が基準になっていると思います。 　これって具体的にどういった理由なのでしょうか？ODが濃い方がタンパク質がたくさん取れるのではないかなと思うのですが……。 　研究室の数人に聞いてみても、「その時期が最もタンパク質を作りやすい」だったり、「菌体が多すぎるとIPTGが効きにくい」だったりと、三者三様な回答です。 　みなさんはどのように理解しているのでしょうか？

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