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(無題) 削除/引用 No.8340-5 - 2019/10/29 (火) 03:34:19 - おお お返事いただいてお礼がまだでした。ろ紙５枚程度使ってるのですね。確かにそれくらい使うとパンパンかもしれません。参考にしながら比較的余裕があるサンプル、実験でまずやってみることにします。

(無題) 削除/引用 No.8340-4 - 2019/10/23 (水) 09:21:45 - まっくろん 　おおさん 　セロファンは使っていませんが，メンブレン間の濾紙を増やしています（5枚程度，意味があるかどうかは置いておいて，気分的に）。これでより膨らんでいるのかもしれません。また詳細な検討はしていませんが，転写時にマーカーのすり抜けが（目視で）観察されない程度の条件で行なっていますので，メンブレンの通過は気にしていません（前回記載した通り，あくまで条件検討用でやってますので）。ただ，もしおおさんが強い電圧をかけないといけない（短時間で大きなタンパク質を転写したいとか）条件なのであれば，セロファンなどでの低分子のすり抜け対策が必要かもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.8340-3 - 2019/10/23 (水) 03:11:02 - おお ありがとうございました。できなくはないとの事。確かに分厚くなるのでそれによる影響はあるかもしれませんね。ちなみにゲルとゲルの間はろ紙で隔ててますか？またセロファンは蛋白などはポアサイズが小さいためブロックができるので挟むという話を聞いたことがあるのですが使ってますか？

(無題) 削除/引用 No.8340-2 - 2019/10/22 (火) 17:16:07 - まっくろん 　バイオラッドのミニトランスブロットセルを使ってたまにやっています。転写は問題なく出来ますが、たまにメンブレンに歪んだ形で転写されたりします。原因は推測でしかないのですが、挟む枚数が増えるのでカセットがパンパンになり、それに伴って電極アッセンブリへのセットがきつくなるため、少し強引にはめ込んだりしてしまい起こったりしているのかなと思ったりしています(ちょっとでかく切りすぎた濾紙やパッドが引っかかったりすることもあって)。なので、本データ用の場合は行わず、条件検討用などを作る時に行います。 　　説明が分かりにくくて申し訳ありませんが、参考になれば幸いです。

２枚のゲルを１つのWet WB トランスファーのカセットで。 削除/引用 No.8340-1 - 2019/10/22 (火) 07:40:47 - おお 二枚のゲルをセミドライで、ろ紙、膜、ゲル、ろ紙、（セロファン）、膜、ゲル、ろ紙というふうな感じで重ねて同時にTransferするという話は聞いたことがあります。これをWetのカセットでやった方いますか？バイオラッドのミニゲルのカセットは２枚同時にセットできるので、この方法だと４枚同時に一つの泳動そうでTransferできることになります。

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