Bio Technical フォーラム

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細胞遊走能の違い(ケモタキシスと創傷治癒)に関して トピック削除
No.8317-TOPIC - 2019/10/13 (日) 00:27:53 - こ
ある遺伝子を導入した細胞株のアッセイで、遊走能を測定しました。24ウェルのメンブレンスライドチャンバーを用いたアッセイでは計3回のトリプリケイトのアッセイで予想通りの結果になったのですが、スクラッチアッセイでは1回目と2回目で逆の結果となりました。
原因を追究しているのですが、スクラッチアッセイは再現性が低い実験なのでしょうか?
宜しくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.8317-2 - 2019/10/15 (火) 01:00:47 - おお
>スクラッチアッセイは再現性が低い実験
そうとまでも言えないとおもいますがで、テクニカルには実際にあなたの実験を見ているわけではないのでなんとも言えません。コンフルの状態でスクラッチしているかとか(これがブレる要因になる可能性はあるかなと)、増殖を抑える工夫をしているか(必要か、どの方法が適切か)など考えて見る必要があるかもしれません。
またこのようなことがメンブレンスライドチャンバーとアッセイの違いとして現れるので、結果が違ってくることはあり得ると思いますし、そういうところを考察していくと面白い仮説がたてれるかもしれません。

また再現性と言われましても誤差の範囲なのかもよくわかりませんし、とにかく数回やって傾向があるのかなど見ていくのもてです。一回の実験でテクニカルTriplicateとかでどれくらいブレるでしょうか?

細胞遊走能の違い(ケモタキシスと創傷治癒)に関して 削除/引用
No.8317-1 - 2019/10/13 (日) 00:27:53 - こ
ある遺伝子を導入した細胞株のアッセイで、遊走能を測定しました。24ウェルのメンブレンスライドチャンバーを用いたアッセイでは計3回のトリプリケイトのアッセイで予想通りの結果になったのですが、スクラッチアッセイでは1回目と2回目で逆の結果となりました。
原因を追究しているのですが、スクラッチアッセイは再現性が低い実験なのでしょうか?
宜しくお願いします。

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