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MEFの使用期限 トピック削除
No.8223-TOPIC - 2019/09/05 (木) 12:01:48 - たま
iPS細胞の維持培養に使用しているMEFの使用期限についての質問です。

E14.5日目のマウスの胎児から採取したMEF(P0)を採取し、3継代後にマイトマイシン処理を行ってiPS細胞の維持培養のフィーダー細胞として使用しています。

P0とMMC処理後のMEFはそれぞれ凍結保存しているのですが、iPS細胞の未分化性の維持という観点から、それぞれ凍結からどれくらいの期間まで使用可能と考えたら良いのでしょうか？
ご教示いただけますと幸いです。
　
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(無題) 削除/引用
No.8223-3 - 2019/09/07 (土) 20:07:24 - たま
コメントありがとうございます。
細胞株は他の研究室からもらった201B7（山中先生樹立）を使用していますが、自分で樹立した疾患iPS細胞も近日使用する予定です。
3年ほど前に実験で使用していたMEFが大量に保存されているのですが、どこかでMEFは1年くらいまでと聞いた記憶があり（勘違いかもしれないのですが）、使用してよいかどうか分からず悩んでいるところです。
実際に培養してみて未分化マーカーの発現を確認してみようと思います。

(無題) 削除/引用
No.8223-2 - 2019/09/06 (金) 20:08:23 - まみぃ
hiPS細胞の未分化・分化マーカーを測定して比較するのが一番かと、、、

使用しているhiPS細胞は自分で樹立したものですか？どこかからもらったものですか？自分で購入したものですか？

MEFの使用期限 削除/引用
No.8223-1 - 2019/09/05 (木) 12:01:48 - たま
iPS細胞の維持培養に使用しているMEFの使用期限についての質問です。

E14.5日目のマウスの胎児から採取したMEF(P0)を採取し、3継代後にマイトマイシン処理を行ってiPS細胞の維持培養のフィーダー細胞として使用しています。

P0とMMC処理後のMEFはそれぞれ凍結保存しているのですが、iPS細胞の未分化性の維持という観点から、それぞれ凍結からどれくらいの期間まで使用可能と考えたら良いのでしょうか？
ご教示いただけますと幸いです。
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