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組織の酵素処理時にFBSは添加すべきでしょうか トピック削除
No.8211-TOPIC - 2019/09/02 (月) 03:08:04 - 組織消化
マウス組織の酵素処理時にFBSやBSAは添加すべきでしょうか？
具体的には、コラゲナーゼ4とディスパーゼ2とDNaseを使用します。

組織は二次リンパ組織であるパイエル板やリンパ節です。
一度FBS有りでやってみましたが、採りたいストローマが採れませんでしたので、ここでお聞きしたいです。

もちろんトリプシン系はFBSを使ってはならないことは想像できますが、そうではないので、みなさんのご意見を聞かせてください。お願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.8211-3 - 2019/09/04 (水) 05:21:58 - M
Collagenase、DNase、Dispaseに限定するならば、血清による阻害は受けないので、入れておいて問題ないと思います。無血清にして改善するとは思いませんが、気になるようなら一回比較実験してみると良いのではないでしょうか？

なお、これらの酵素の活性化にはCa2+が必要ですので、酵素処理で用いる培地の組成は要確認です。ちなみに血清にはカルシウムが入ってますよね。

(無題) 削除/引用
No.8211-2 - 2019/09/03 (火) 16:03:27 - おお
出回っているプロトコールにFCSやBSAを入れるものと、そうでないものがあるという事ですか？

コラゲナーゼやディスパーゼは血清成分の影響は受けないと商品カタログ等に描かれています。

組織の酵素処理時にFBSは添加すべきでしょうか 削除/引用
No.8211-1 - 2019/09/02 (月) 03:08:04 - 組織消化
マウス組織の酵素処理時にFBSやBSAは添加すべきでしょうか？
具体的には、コラゲナーゼ4とディスパーゼ2とDNaseを使用します。

組織は二次リンパ組織であるパイエル板やリンパ節です。
一度FBS有りでやってみましたが、採りたいストローマが採れませんでしたので、ここでお聞きしたいです。

もちろんトリプシン系はFBSを使ってはならないことは想像できますが、そうではないので、みなさんのご意見を聞かせてください。お願いします。
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