Bio Technical フォーラム

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WBでマーカーが検出される トピック削除
No.8202-TOPIC - 2019/08/29 (木) 02:37:07 - おお
WBで使うサイズマーカーなんですが、Lysateなどで特異的に検出できているけど、マーカーが反応しているということはありませんか?ま、あまり気にしてないんですけど、皆さんはどうされてるかなとか、なにか突っ込んで追求した方はいらっしゃるかなと思いまして。
 
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No.8202-7 - 2019/09/04 (水) 09:11:36 - おお
め さん

コメント、対処方法ありがとうございました。そういえばバイオラッド使っているけど75kDaの赤のマーカーは強い事が多いです。偶然なのかもしれませんけど。

hoit さん

メーカーからの情報ありがとうございます。自然界にない蛋白なのですね(もしかしたら昔にそんな説明を受けてたかも、、、)。確かにタンパク量としては多いだろうから、検出で引っかかりやすいというのも理屈としては納得できます。そういえばネイティブの電気泳動してWBしたときもPrestainでなかったけど、マーカーとしてつかったフェリチンとかがバッチリ引っかかってました。

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No.8202-6 - 2019/08/31 (土) 18:54:08 - hoit
昔メーカーに聞きました。そこのめーかーのマ―カーは、まーかーの構成蛋白質は自然界にはそんざいしない人工蛋白質らしいです。で、バンド1つ1つの蛋白質量は多いのでこうたいによってはどうしてもそのようなことは起こります、と言われました。要は、そういうときもあるけどまあしょうがないということでした。

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No.8202-5 - 2019/08/29 (木) 09:14:35 - め
特定の抗体で検出されることがあります.
Lysateのバンドより濃いので1レーン空けて流し,検出の時は空きレーンに書き込んで元のマーカーは切り取っています.

日本ジェネティクスのBLUE Star Prestained Protein-Markerを使っていて75 kDaの赤のバンドのみ検出されます.

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No.8202-4 - 2019/08/29 (木) 07:24:59 - おお
あ、わたしはBioradの75と25がピンクのやつを使ってます。
できる方は使っているマーカーなどの情報していただければと思います。

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No.8202-3 - 2019/08/29 (木) 07:20:56 - おお
そうですよね。私の場合はあまり反応しないサイズもあったりですが。

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No.8202-2 - 2019/08/29 (木) 06:43:57 - 不死化
ためにマーカーが反応することがありますね...再現性があるわけではないのですが、たまにマーカーが全てXフィルムに映る時があります。

WBでマーカーが検出される 削除/引用
No.8202-1 - 2019/08/29 (木) 02:37:07 - おお
WBで使うサイズマーカーなんですが、Lysateなどで特異的に検出できているけど、マーカーが反応しているということはありませんか?ま、あまり気にしてないんですけど、皆さんはどうされてるかなとか、なにか突っ込んで追求した方はいらっしゃるかなと思いまして。

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